[发明专利]一种可稳定保存的肺癌融合基因检测试剂盒的RNA质控品

说明书

本发明公开了一种可稳定保存的肺癌融合基因检测试剂盒的RNA质控品，所述RNA质控品包含以下组分：阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品。所述阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品中分别含有相应融合基因RNA、金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；所述防腐剂选自甘氨酸、ε‑聚赖氨酸或半胱氨酸。本发明提供的RNA质控品可以有效防止游离RNA的降解，为RNA提供稳定的环境，延长RNA的保存时间，同时具有制备成本低、性能稳定和易保存等优点，可有效地监控人员操作、仪器状态以及试剂盒有效性等因素，极大地提高了检测试剂盒的准确性和可靠性。

技术领域

本发明属于基因检测领域，具体涉及一种可稳定保存的肺癌融合基因检测试剂盒的RNA质控品。

背景技术

肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，严重危害人类健康。2012年全球肿瘤流行病统计数据显示，全球每年的癌症新发病例约1410万例，死亡约820万例，其中，肺癌发病为182.5万例，死亡约159.0万，居首位例。肺癌分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和小细胞肺癌，NSCLC占全部肺癌的80％左右。染色体重排和基因重排是恶性肿瘤中常见的遗传学改变，2007年Soda等首次在肺癌患者体内发现棘皮动物微管相关类蛋白4(EML4)基因与间变性淋巴瘤激酶(ALK)的融合基因，该发现第一次证实了在NSCLC中存在基因融合。ALK融合基因作为一个新的癌基因参与NSCLC的发展过程，其发生率约为5％，针对ALK融合基因的靶向抑制剂吉非替尼、厄洛替尼、克唑替尼目前已经广泛应用于NSCLC临床治疗。在NSCLC中还发现ROS1、RET融合基因。

在使用靶向抑制剂治疗肺癌前，融合基因筛查已经成为一项重要且必须的指标。美国国立综合癌症网络临床实践指南、欧洲肿瘤内科学会肺癌共识以及中国晚期非小细胞肺癌分子靶向治疗专家共识均明确建议：NSCLC患者在接受治疗之前应先检测EGFR、ALK和ROS1基因，根据基因状态决定相应的治疗策略，并建议在条件许可下同时进行三个基因的检测。

目前，检测肺癌驱动的融合基因的方法主要包括荧光原位杂交技术(FISH)、免疫组织化学方法(IHC)和实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)。基于上述方法已研发出了多种肺癌融合基因检测试剂盒，但是目前市面上并没有经济、有效、稳定和通用的肺癌融合基因检测试剂盒的质控品销售，且现有的RNA质控品类产品多具有不稳定、易降解和不易保存等缺点，而质控品又是衡量和评估一款试剂盒检测准确性和稳定性等性能的重要方法和质量指标。

发明内容

基于此，本发明的目的之一在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种可稳定保存的肺癌融合基因检测试剂盒的RNA质控品，其制作成本低、性能稳定、易保存，可有效地监控人员操作、仪器状态以及试剂盒有效性等因素，极大地提高了肺癌融合基因检测的准确性和可靠性。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种可稳定保存的肺癌融合基因检测试剂盒的RNA质控品，所述RNA质控品包含以下组分：阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品；

所述阳性参考品包含以下组分：所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；

所述阴性参考品包含以下组分：非所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；

所述检测限参考品包含以下组分：所述肺癌融合基因RNA、非所述肺癌融合基因RNA、金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐，且所述肺癌融合基因RNA占总RNA的质量比为1～5％；

所述防腐剂选自甘氨酸、ε-聚赖氨酸或半胱氨酸。

优选地，所述阳性参考品、阴性参考品和检测限参考品中金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔浓度为：金精三甲酸铵盐100～500μM、甘氨酸80～180mM和苯丁抑制素盐酸盐20～60nM。