[发明专利]一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法

权利要求书

1.一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于：该方法采用6+8的合成方式，先合成6肽片段，之后将片段偶联到固相树脂上，通过对Cys不同位置的保护基，在固相树脂上完成了三个二硫环的选择性合成，之后将其从树脂上切割下来，直接进行纯化。

2.根据权利要求1所述的一种采利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于：其具体步骤如下：

A、片段缩合成各类利拉洛肽中间体，氨基酸保护基在下面赋予种类：

（1）R-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;

（2）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;

（3）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;

（4）R-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;

（5）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-R3的合成;

（6）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-R3的合成;

（7）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;

（8）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;

（9）R-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成;

（10）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly- Cys(R1)-Tyr(R4)-R3;

（11）R-Cys(-S-S-)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly- Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚键环；

(12)R-Cys(-S-S-)-Cys(-S-S-)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(-S-S-)-Thr(R4)-

Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚环基础上，2号位和10号位的两个半胱氨酸再成硫醚环；

(13)R-Cys(-S-S-)-Cys(-S-S-)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(-S-S-)-Thr(R4)-

Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚环基础上，2号位和10号位的两个半胱氨酸再成第二个硫醚环，5号位和13号位的两个半胱氨酸形成第三个硫醚环；

以上所述的各种保护氨基酸片段缩合后，形成的利拉洛肽各种中间体片段；

其中：

R为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、oNBS、dNBS、Troc、Dts、pNZ、oNZ、NVOC、NPPOC、HFA、 Ddz、Bpoc、Nps、Nsc、Bsmoc、α-Nsmoc、ivDde、Fmoc* 、MTT、Alloc 其中任意一个；

R1为Meb、Mob、TRT、Tmob、Mmt、Xan、Pmbf、Bn、tBu、Fm、Dnpe、Fmoc、Acm、Phacm、S^tBu、Npys、Alloc其中任意一个；

R2为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个；

R3为H、OMe、OEt、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb、wang树脂、CTC树脂其中任意一个；

R4为Bn、cHx、tBu、Trt、TBDMS、Dmnb、Poc其中任意一个；

B、全保护利拉洛肽的去保护；得到L-Cys-L-Cys-L-Glu-L-Tyr-L-Cys-L-Cys-L-Asn-L-Pro-L-Ala-

L-Cys-L-Thr-Gly-L-Cys-L-Tyr，cyclic (1-6)，(2-10)，(5-13)-tris (disulfide)；

C、利拉洛肽的纯化和冻干。