[发明专利]用于河道黑臭水治理的复合微生态制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于河道黑臭水治理的复合微生态制剂，其特征在于，该复合微生态制剂由光合细菌、硝化细菌、反硝化细菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和放线菌组成，按质量比计：光合细菌：硝化细菌：反硝化细菌：枯草芽孢杆菌：嗜酸乳杆菌：产朊假丝酵母：放线菌为2:2:1:1:1:1:2。

2.根据权利要求1所述的用于河道黑臭水治理的复合微生态制剂的制备方法，其特征在于，所述复合微生态制剂中的光合细菌采用以下方式制得，包括：

a.制作种子液：取纯化好的光合细菌单菌落，接种到液体培养基中，30℃，200r/min，光照强度为3000 1x培养72h，得到种子液；其中，所述液体培养基为按下述比例配制的混合液：氯化铵1g/L，乙酸钠3.5g/L，氯化镁0.1g/L，氯化钙0.1g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，磷酸氢二钾0.4g/L，酵母膏0.1g/L，pH值7.5-8.0，121℃灭菌20min；

b.发酵生产：将步骤a中制得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基构成与所述步骤a中的种子液中的液体培养基相同，培养条件与所述步骤a中的培养条件相同，发酵72h，即得到光合细菌菌液；

所述复合微生态制剂中的硝化细菌采用以下方式制得，包括：

c.制作种子液：取纯化好的硝化细菌单菌落，接种到液体培养基中，30℃，200r/min培养72h，得到种子液；其中，所述培养基为按下述比例配制的混合液：硫酸铵1g/L，磷酸氢二钾1g/L，氯化钠0.3g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸亚铁0.03g/L，pH值7.5-8.0，121℃灭菌20min；

d.发酵生产：将所述步骤c中制得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基构成与所述步骤c中的种子液的液体培养基相同，培养条件与所述步骤c中的培养条件相同，发酵72h，即得到硝化细菌菌液；

所述复合微生态制剂中的反硝化细菌采用以下方式制得，包括：

e.制作种子液：取纯化好的反硝化细菌单菌落，接种到液体培养基中，30℃，100r/min培养24h，得到种子液；其中，所述液体培养基为按下述比例配制的混合液：乙酸钠2g/L，硝酸钠1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，硫酸镁0.2g/L，微量元素2mL/L，pH值6.8-7.2，121℃灭菌20min；所述微量元素为：EDTA 2.06g/L，硫酸亚铁1.54g/L，氯化锰0.2g/L，硫酸锌0.1g/L，硫酸铜0.02g/L，锰酸钠0.1g/L，氯化钴2mg/L，pH值6.8-7.2；

f.发酵生产：将步骤e中制得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基的构成与所述步骤e中的种子液的液体培养基相同，培养条件与所述步骤e中的培养条件相同，发酵24h，即得到反硝化细菌菌液；

所述复合微生态制剂中的枯草芽孢杆菌采用以下方式制得，包括：

g.制作种子液：取纯化好的枯草芽孢杆菌单菌落，接种到液体培养基中，37℃，200r/min培养18h，得到种子液；其中，所述培养基为按下述比例配制的混合液：胰蛋白胨10g/L，酵母浸粉5g/L，氯化钠10g/L，pH值7.0-7.5，121℃灭菌20min；

h.发酵生产：将所述步骤g中制得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基的构成与所述步骤g中的种子液的液体培养基相同，培养条件与所述步骤g中的培养条件相同，待出孢率达到90％以上停止发酵，即得到枯草芽孢杆菌菌液；

所述复合微生态制剂中的嗜酸乳杆菌采用以下方式制得，包括：

i.制作种子液：取纯化好的嗜酸乳杆菌单菌落，接种到液体培养基中，37℃，100r/min，培养24h，得到种子液；其中，所述培养基为按下述比例配制的混合液：蛋白胨10g/L，牛肉粉5g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉4g/L，乙酸钠5g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸镁0.2g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸锰0.05g/L，吐温801mL/L，pH值7.0-7.5，115℃灭菌20min；

j.发酵生产：将所述步骤i中制得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基的构成与所述步骤i中的种子液的液体培养基相同，培养条件与所述步骤i中的培养条件相同，发酵18h，即得到嗜酸乳杆菌菌液；

所述复合微生态制剂中的产朊假丝酵母菌采用以下方式制得，包括：

k.制作种子液：挑取纯化好的产朊假丝酵母菌单菌落，接种到液体培养基中，28℃，200r/min，培养24h，得到种子液。

所述培养基为按下述比例配制的混合液：酵母粉10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5-7.0，115℃灭菌20min。

l.发酵生产：将步骤k中所得的种子液按体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基同于步骤k中的种子液培养基，培养条件同于步骤k，发酵24h，得到产朊假丝酵母菌菌液；

所述复合微生态制剂中的放线菌采用以下方式制得，包括：

m.制作种子液：取纯化好的放线菌单菌落，接种到液体培养基中，28℃，200r/min，培养48h，得到种子液；其中，所述培养基为按下述比例配制的混合：液可溶性淀粉20g/L，氯化钠0.5g/L，硝酸钾1g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸亚铁0.01g/L，pH值7.0-7.5，121℃灭菌20min；

n.发酵生产：将所述步骤m中所得的种子液按照体积比5％接种到发酵培养基中，所述发酵培养基的构成与所述步骤m中的种子液的液体培养基相同，培养条件与所述步骤m中的培养条件相同，发酵48h，即得到放线菌菌液。