[发明专利]一种随机打断DNA的方法有效
申请号: | 201711486034.6 | 申请日: | 2017-12-30 |
公开(公告)号: | CN109988817B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 潘伟业;程世月;王亚蕾;彭琼芳;玄兆伶;李大为;梁峻彬;陈重建 | 申请(专利权)人: | 安诺优达基因科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176 北京市大兴区北京经济*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 随机 打断 dna 方法 | ||
1.一种随机打断DNA的方法,其包括:
在二价阳离子、随机DNA双链结合蛋白质、非离子表面活性剂以及一价盐的存在下,使用非限制性内切酶对DNA分子进行打断,其中,
所述二价阳离子为选自钙离子、镁离子中的一种或两种,所述二价阳离子的使用浓度为0.04mM~0.1mM,
所述随机DNA双链结合蛋白质为sso7d蛋白质,所述随机DNA双链结合蛋白质的使用浓度为3ng/μL~6ng/μL,
所述非离子表面活性剂为选自TritonX-100、Tween-20、Tween-80中的一种或两种以上,所述非离子表面活性剂的使用浓度为0.01%~0.2%,
所述一价盐中的金属离子为选自钠离子、钾离子中的一种或两种,所述一价盐的使用浓度为20mM~200mM,
所述非限制性内切酶为选自DNAse I、HL-dsDNase中的一种或两种。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,
所述随机DNA双链结合蛋白质的使用浓度为4ng/μL~6ng/μL。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,
所述一价盐的使用浓度为50mM~100mM。
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