[发明专利]一种超声波提取沙棘活性多肽的方法

说明书

本发明公开了一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，具体制备步骤为：将沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，初粉碎后超微粉碎得沙棘超微粉；向沙棘超微粉中加入蒸馏水、纤维素酶、植酸酶与单宁酶，水解，灭酶，离心，留取沉淀物质，干燥；向沙棘粉中加入蒸馏水、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和左旋维生素C，超声波辅助提取，灭酶，冷却后的酶解液超滤得沙棘活性多肽粗液；将沙棘活性多肽粗液加入到色谱柱中，用双蒸水洗脱，洗脱液加入到大孔树脂柱，依次用双蒸水和乙醇溶液洗脱，洗脱液干燥得沙棘活性多肽。有益效果为：本发明提取方法简单可行，预处理时间短，沙棘活性蛋白纯度高、提取率高，得到的沙棘活性多肽具有抗菌性和保水性。

技术领域

本发明涉及多糖技术领域，尤其是涉及一种超声波提取沙棘活性多肽的方法。

背景技术

沙棘（Sea Buckthorn）又名醋柳，胡颓子科沙棘属，是一种落叶性灌木。国内分布于华北、西北、西南等地。沙棘为药食同源植物。沙棘的根、茎、叶、花、果，特别是沙棘果实含有丰富的营养物质和生物活性物质，可以广泛应用于食品、医药、轻工、航天、农牧鱼业等国民经济的许多领域。沙棘果实入药具有止咳化痰、健胃消食、活血散瘀之功效。现代医学研究，沙棘可降低胆固醇，缓解心绞痛发作，还有防治冠状动脉粥样硬化性心脏病的作用。沙棘籽渣为沙棘油加工生产后的废弃物，通常只有少量用作饲料，大部分都是作为垃圾废弃掉。而经过提取沙棘油的沙棘籽渣中的蛋白含量达27-30％，蛋白资源被浪费掉。但是由于沙棘籽中含有有较多的植酸和单宁类物质，可能会影响沙棘巧蛋白的消化吸收，所以要想利用这些蛋白，就应当对沙棘籽渣进行处理后再利用。将蛋白加工成多肽，不但能够提高蛋白质在人体内的消化利用率而且产出的多肽会因选取蛋白质的不同而可能具有某种生理活性，所以利用沙棘籽渣废弃物加工出促进生长发育、抗氧化及抑菌防腐的沙棘多肽。该沙棘多肽可应用于食品添加剂及饲料添加剂。水解沙棘蛋白制备多肽的方式多种多样，主要有酸式水解、碱式水解、蛋白酶水解以及等电渗点解等工艺，随着蛋白水解技术日益完善，将极大地促进蛋白产业的发展。

现有技术如授权公告号为CN 103421873 B的中国发明专利，公开了一种具有抑菌作用的沙棘籽多肽的制备方法，步骤包括：将沙棘籽渣经过浸泡处理后，用单宁酶、植酸酶组成的复合酶水解处理沙棘籽渣，再用酸性蛋白酶与木瓜蛋白酶联合水解底物中的蛋白质，将多肽水解液低温静置过夜，然后通过低温高速离心去除大分子杂质，离心上清液浓缩、干燥后得到沙棘籽抑菌多肽。体外抑菌培养试验表明，此多肽对大肠杆菌、沙门氏菌等常见细菌都具有良好的抑制作用。该多肽口感好，没有副作用，可以作为防腐剂添加到食品或饲料中使用。但是该多肽制备方法用时较长，提取效率低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取方法简单可行，预处理时间短，沙棘活性蛋白纯度高、提取率高，得到的沙棘活性多肽具有抗菌性和保水性的超声波提取沙棘活性多肽的方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种超声波提取沙棘活性多肽的方法，包括沙棘超微粉制备、沙棘超微粉预处理、超声波辅助提取、分离纯化，其具体制备步骤为：

沙棘超微粉制备：将沙棘籽中加入吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖，混合均匀，初粉碎至40-80目，然后超微粉碎至500-700目，即得沙棘超微粉，备用，上述吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的添加量分别为沙棘籽重量的0.2-0.24‰和0.1-0.15‰，吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的加入能够防止沙棘蛋白在超微粉碎时发生变性，减小沙棘蛋白的损失，且吡喃葡萄糖和吡喃半乳糖的存在可协助植酸酶与单宁酶快速识别植酸与单宁的位置，进而快速酶解除去沙棘中的纤维素、植酸和单宁类物质，减少沙棘超微粉预处理所需的时间，提高沙棘蛋白溶出率，经过初粉碎能够为超微粉碎提供一定细度的原料，使超微粉碎更加容易进行，提高超微粉碎的工作效率，降低能耗，节约生产能耗和成本，超微粉碎能够破坏沙棘籽的细胞壁，使细胞内蛋白质充分暴露出来，提高了沙棘籽多肽的提取速率；