[发明专利]与脂尾型绵羊的尾型性状相关的SNP标记及应用

权利要求书

1.一种与脂尾型绵羊呼伦贝尔短尾羊的尾型性状相关的SNP标记，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，在该序列的第186位的碱基为G或T。

2.权利要求1所述SNP标记在乌珠穆沁羊、苏尼特羊、巴尔虎羊和呼伦贝尔短尾羊中鉴定呼伦贝尔短尾羊的应用。

3.权利要求2所述的应用，其特征在于：当SEQ ID NO.1的第186bp处，碱基为 T 时，绵羊为呼伦贝尔短尾羊。

4.一种在乌珠穆沁羊、苏尼特羊、巴尔虎羊和呼伦贝尔短尾羊中鉴定呼伦贝尔短尾羊的方法，其特征在于：它包括以下步骤 :

(1)提取待测脂尾型绵羊基因组DNA，以其为模板，所述待测脂尾型绵羊为乌珠穆沁羊、苏尼特羊、巴尔虎羊或呼伦贝尔短尾羊；

(2)利用特异性引物,正向引物:5’- CACAAGAAGGTGCAGAGTCACA -3’;反向引物:5’-CCTGCCTTTGGCCTCACGAT -3’,进行PCR扩增反应,获得扩增产物片段;

配制50μl PCR 反应体系：50 ng/μl模板DNA 4μl，10pmol/μl正向引物和反向引物各2μl，2×Taq PCR MasterMix 25μl，17μl去离子水；

PCR反应使用的扩增程序为：94℃，5分钟；94℃，30秒；57℃，30秒；72℃，30秒；35 个循环；72℃，10分钟，4℃保存。

（3）PCR 扩增产物采用酶切法进行鉴定，具体为：用内切酶 PasI对 PCR 扩增产物进行酶切，并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；如果检测结果为187bp和206bp的两条带，则待测脂尾型绵羊属于呼伦贝尔短尾羊，且基因型为纯和TT 型；检测结果为390bp、187bp和206bp三条带，则待测脂尾型绵羊属于呼伦贝尔短尾羊,且基因型为杂合 TG 型。