[发明专利]一种检测大蒜根系分泌物中硫醚类化合物的方法

权利要求书

1.一种检测大蒜根系分泌物中硫醚类化合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取硫醚类化合物的标准品，以水为溶剂，按照浓度梯度配制成多份标准品溶液；

(2)在不同浓度的标准品溶液中分别加入乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯层，蒸干溶剂后分别用正己烷复溶并定容，备用；

(3)采用气相色谱-质谱联用仪对经步骤(2)处理后的标准品溶液进行检测，得GC-MS谱图；将所述多份标准品溶液的浓度与其各自在所述GC-MS谱图中对应的峰面积进行曲线拟合，得浓度-峰面积标准曲线；

(4)将待测的新鲜大蒜的根系浸泡于无菌水中，收集含有待测样品根系分泌物的浸泡液，具体为：将15～25株新鲜大蒜的根系浸泡于100～200ml无菌蒸馏水中，隔绝空气静置2～4小时，过滤去除不溶物，即得；

采用与步骤(2)相同的方法对所述浸泡液进行处理，再采用与步骤(3)相同的方法进行检测，得到待测样品GC-MS谱图；

(5)将所述待测样品GC-MS谱图与标准品溶液的GC-MS谱图进行对比，确定待测样品中是否含有与所述标准品相同的硫醚类化合物；

(6)将经步骤(5)确定与所述标准品相同的硫醚类化合物在所述待测样品GC-MS谱图中对应的峰面积代入步骤(3)所得的浓度-峰面积标准曲线中，求得所述待测样品中硫醚类化合物的含量；

所述硫醚类化合物为二烯丙基二硫醚；

所述气相色谱条件包括：SH-Rxi-5Sil MS色谱柱，柱压为49～50kpa，起始柱温35～45℃，以2.5～3.5℃/min的速度升温至75～85℃，然后以4.5～5.5℃/min的速度升温至255～265℃，保持25～35min，载气为氦气，进样口温度245～255℃，进样量1.5～2.5μl，进样方式为分流进样，分流比为8～12:1；

所述质谱条件包括：EI电离源，离子源温度225～235℃，接口温度245～255℃；扫描范围m/z 35-500，采集方式Scan，扫描间隔0.25～0.35s。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述多份标准品溶液的浓度分别为：0、100mg/L、200mg/L、400mg/L、600mg/L。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述萃取是采用乙酸乙酯与水溶液体积比1.5～2.5：1的比例萃取2～3次，合并萃取液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述蒸干溶剂是在40～60℃条件下通过旋转蒸发将溶液浓缩至干。

5.根据权利要求1的方法，其特征在于，步骤(2)所述定容是指以正己烷为溶剂定容至1.5～2.5ml。