[发明专利]一种提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法

权利要求书

1.一种提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法，其特征在于，所述提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法为：利用组培方法将实生种子扩繁成多株试管苗，种植试管苗繁殖F1代薯块并筛选优良株系；包括实生种子消毒、培养基添加生长调节剂高效解除种子休眠、扩繁试管苗、株系间分行栽培、分批收获薯块、催芽处理和秋季大田二次筛选；

所述提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法包括以下步骤：

步骤一，从果实中清洗的实生种子放于1.5 mL EP管中，用移液器取75%乙醇处理10-20s，无菌水洗4遍，4%次氯酸钠处理20 min，无菌水洗4-5遍，倒入无菌滤纸上吸干多余水份备用；

步骤二，基本培养基为MS，pH 5.9-6.0，121℃ 20 min高温灭菌后在超净台上加入过滤灭菌的生长调节剂6-苄基腺嘌呤和赤霉素，6-苄基腺嘌呤为0.5 mg/L，赤霉素GA₃为1 mg/L，倒平板25 mL/皿，待平板凝固冷却后用镊子将种子播于平板上；

步骤三，7-10 d实生种子在平板上萌发长出根系和幼苗，幼苗剪下播于瓶装MS培养基中，14 d后长成试管苗，分单株扩繁，剪取带1-2个腋芽的试管苗茎段接入MS培养基，每株能扩繁出3-4株； 14d后再按单个株系接入1瓶，每瓶10-15株的方式二次扩繁；

步骤四，提前半月将蛭石：椰糠按1:2比例加水混匀，同时加入复合肥50 g/m²和腐熟有机肥150 g/m²，畦底铺黑网膜与土壤隔开，上铺基质；

步骤五，待试管苗生长14-20 d，移至室外揭盖炼苗1-2 d，清洗去掉琼脂，放回带水的原瓶中恢复过夜；第2 d栽种，每个株系1行，株距10 cm，行距20 cm；株系间用长100 cm、高20 cm塑料板深插入基质中隔开；

步骤六，试管苗移栽后60 d可开始陆续收薯；

步骤七，将收获的薯块贮藏于3~4 ℃冷库，8月初配制催芽促结薯溶液：0.24 mg/L 24-表油菜素内酯 + 20 mg/L 赤霉素；每个株系各取大小在10 g的薯块10粒，置于溶液中浸泡10 min，室内散射光下放置催芽，剩余薯块继续贮藏于3~4 ℃冷库；薯块在8月底或9月初播种于大田。

2.如权利要求1所述的提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法，其特征在于，所述步骤三中培养条件：16h光/8h暗，光强60 µmol·m^-2·s^-1，22±1℃；扩繁同时，各株系剪取1个带芽顶端接入保苗培养基中保存，保苗培养基：MS+2%蔗糖+3%山梨醇+0.7%琼脂，120 d转接1次。

3.如权利要求1所述的提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法，其特征在于，所述步骤四中复合肥为N：P₂O₅：K₂O=16:9:20。

4. 如权利要求1所述的提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法，其特征在于，所述步骤五中移栽后还需盖膜保温保湿，待10-14 d新根长出后揭膜。

5. 如权利要求1所述的提高马铃薯实生种子利用及筛选效率的方法，其特征在于，所述步骤七中种植方式：1垄双行错窝播种，垄宽80 cm，株距25 cm，垄距100 cm。