[发明专利]一种黑枸杞初代培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种黑枸杞初代培养基，其特征在于，包括大量元素组分、微量元素组分、铁盐组分、有机物组分、肌醇、琼脂粉、蔗糖和6-苄基氨基嘌呤；所述大量元素组分包括：硝酸钾、硝酸铵、二水氯化钙、七水硫酸镁和磷酸二氢钾；所述微量元素组分包括：碘化钾、硼酸、硫酸锰、七水硫酸锌、钼酸钠、五水硫酸铜和氯化钴；所述铁盐组分包括：硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠；所述有机物组分包括：烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸。

2.如权利要求1所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，所述大量元素组分中各组分的浓度分别如下：硝酸钾1850-1900mg/L，硝酸铵1650-1700mg/L，二水氯化钙400-450mg/L，七水硫酸镁350-400mg/L，磷酸二氢钾150-200mg/L。

3.如权利要求2所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，所述微量元素组分中各组分的浓度分别如下：碘化钾0.8-0.9mg/L，硼酸6.0-6.5mg/L，硫酸锰22.0-22.5mg/L，七水硫酸锌8.5-9.0mg/L，钼酸钠0.25-0.30mg/L，五水硫酸铜0.025-0.030mg/L，氯化钴0.025-0.030mg/L。

4.如权利要求3所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，所述铁盐组分中各组分的浓度分别如下：硫酸亚铁27.5-28.0mg/L，乙二胺四乙酸二钠37.0-37.5mg/L。

5.如权利要求4所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，所述有机物组分中各组分的浓度分别如下：烟酸0.45-0.50mg/L，盐酸吡哆醇0.45-0.50mg/L，盐酸硫胺素0.10-0.15mg/L，甘氨酸1.5-2.0mg/L。

6.如权利要求5所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，肌醇的浓度0.1-0.3mg/L，琼脂粉的浓度为450-500mg/L，蔗糖的质量百分浓度为3％，6-苄基氨基嘌呤的浓度为0.001-0.003mg/L。

7.如权利要求1所述的黑枸杞初代培养基，其特征在于，所述培养基用酸碱指示剂将pH调至5.8-6.0。

8.一种如权利要求6所述的黑枸杞初代培养基的制备方法，其特征在于，包括：

大量元素母液制备步骤：分别取除二水氯化钙外的其余大量元素组分，混合，配制成大量元素母液，所述大量元素母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的10倍；二水氯化钙单独配制，二水氯化钙溶液的浓度为配方浓度的10倍；

微量元素母液制备步骤：分别取微量元素组分，混合，配制成微量元素母液，所述微量元素母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的100倍；

铁盐母液制备步骤：分别配制硫酸亚铁溶液和乙二胺四乙酸二钠溶液，然后混合，调节pH并定容，获取铁盐母液；

有机物母液制备步骤：分别取有机物组分，混合，配制成有机物母液，所述有机物母液中各组分的浓度均为各自配方浓度的50倍；

6-苄基氨基嘌呤母液制备步骤：取6-苄基氨基嘌呤制备6-苄基氨基嘌呤母液，6-苄基氨基嘌呤母液的浓度为配方浓度的50倍；

混合定容加热步骤：分别取大量元素母液20-30ml、二水氯化钙溶液20-30ml、微量元素母液5-10ml、铁盐母液5-10ml、有机物母液5-10ml、肌醇0.1-0.2g、琼脂粉3.5-4.8g、蔗糖20-40g、6-苄基氨基嘌呤母液0.1-0.3ml，混合，待蔗糖和肌醇溶解后，定溶到1L，然后加热直至琼脂粉融化，接着分装至培养瓶，冷却凝固后即得。

9.如权利要求8所述的黑枸杞初代培养基的制备方法，其特征在于，还包括灭菌步骤：加热直至琼脂粉融化，分装到培养瓶中，每瓶20-30ml，盖紧瓶盖，将培养瓶放到温度为121-125℃、压力为0.15-0.3MPa的灭菌锅中，灭菌20-30min，灭菌完毕出锅，拧紧培养瓶盖并放到培养基储放室，冷却凝固后即得。

10.如权利要求8所述的黑枸杞初代培养基的制备方法，其特征在于，在所述大量元素母液制备步骤中：分别取除二水氯化钙外的其余大量元素组分，混合在500ml烧杯中，加蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌，然后倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，获取大量元素母液；

在所述微量元素母液制备步骤中：分别取微量元素组分，混合在烧杯内，加蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，获取微量元素母液；

在所述铁盐母液制备步骤中：分别取硫酸亚铁27.0-27.5g，乙二胺四乙酸二钠27-28g；将硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠分别溶于450ml蒸馏水中，加热，不断搅拌，溶解后，两溶液混合，调pH至5.5，加水定容至1000ml，获取铁盐母液；

在所述有机物母液制备步骤中：分别取有机物组分，混合在烧杯内，加蒸馏水溶解后，定容在500ml容量瓶中，获取有机物母液；

在所述6-苄基氨基嘌呤母液制备步骤中，取6-苄基氨基嘌呤，蒸馏水溶解后，定容在500ml容量瓶中，获取6-苄基氨基嘌母液。