[发明专利]氧化石墨烯聚乙二醇复合物的应用及聚合酶链式反应的方法

说明书

本发明提供了一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物在聚合酶链式反应中的应用。与现有技术相比，本发明在聚合酶链式反应中添加氧化石墨烯聚乙二醇复合物，在低浓度的氧化石墨烯聚乙二醇复合物的条件下，PCR各组分能够被吸附在氧化石墨烯聚乙二醇复合物表面，使反应在其表面上进行，特异性明显增强，不会有其他扩增产物产生。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物的应用及聚合酶链式反应的方法。

背景技术

自从聚合酶链式反应(PCR)问世以来，人们就不断尝试着通过添加外来物质对它进行优化改良。传统添加剂改进PCR的空间越来越小，表现出难以克服的局限性。因此，人们试图转变观念，从新兴材料中寻求突破，寻找替代品。2012年，Sun课题组首次研究并报道了石墨烯能增强PCR的特异性：以pET-32a质粒为模板，比较了氧化石墨烯和还原石墨烯对PCR的影响，发现在一定浓度范围内，均能增强PCR特异性，并表现出明显的浓度依赖性和模板依赖性。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物的应用及聚合酶链式反应的方法。

本发明提供了一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物在聚合酶链式反应中的应用。

本发明还提供了一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物作为聚合酶链式反应特异性增强剂的应用。

优选的，所述聚合酶链式反应的体系中氧化石墨烯聚乙二醇复合物的浓度为0.8～11.2μg/ml。

本发明还提供了一种聚合酶链式反应的方法，包括：

S1)将聚合酶链式反应体系依次进行热变性、退火与延伸，完成DNA的半保留复制；所述聚合酶链式反应体系中包括氧化石墨烯聚乙二醇复合物；

S2)反复重复热变性、退火与延伸的步骤，完成聚合酶链式反应。

优选的，所述氧化石墨烯聚乙二醇复合物按照以下步骤制备：

S)将氧化石墨烯与氨基修饰的聚乙二醇混合反应，得到氧化石墨烯聚乙二醇复合物。

优选的，所述步骤S)具体为：

S1)将氧化石墨烯进行碱性处理，得到处理后的氧化石墨烯；S2)在羧基活化试剂存在的条件下，将处理后的氧化石墨烯与氨基修饰的聚乙二醇混合反应，得到氧化石墨烯聚乙二醇复合物。

优选的，所述步骤S2)具体为：

将处理后的氧化石墨烯与氨基修饰的聚乙二醇混合反应，然后加入部分羧基活化试剂超声混合，再加入余下的羧基活化试剂搅拌，离心后，得到氧化石墨烯聚乙二醇复合物。

优选的，所述氧化石墨烯聚乙二醇复合物中聚乙二醇的聚合度为 200～4000。

优选的，所述氧化石墨烯聚乙二醇复合物中聚乙二醇的接枝率为 10％～40％。

本发明提供了一种氧化石墨烯聚乙二醇复合物在聚合酶链式反应中的应用。与现有技术相比，本发明在聚合酶链式反应中添加氧化石墨烯聚乙二醇复合物，在低浓度的氧化石墨烯聚乙二醇复合物的条件下，PCR各组分能够被吸附在氧化石墨烯聚乙二醇复合物表面，使反应在其表面上进行，特异性明显增强，不会有其他扩增产物产生。

附图说明

图1为本发明实施例中PCR产物的电泳图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。