[发明专利]一种水溶性类胡萝卜素及其发酵制备方法

权利要求书

1.一种水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）种子培养：将黑附球菌在PDA培养基中进行划线培养，培养3-4天后使用无菌水洗下菌丝体，制得菌丝体悬液，即为发酵用种子液；

（2）发酵：取种子液接种于与发酵培养基中，然后在28-32℃条件下培养4-7天；

（3）提纯：发酵结束后，按发酵培养基质量加入5-6倍重量的去离子水，浸泡并搅拌均匀，在20-60℃水浴中浸提30-90min，浸提液经离心除杂，然后将上清液真空冷冻干燥得到水溶性类胡萝卜素粗品；将水溶性类胡萝卜素粗品在室温条件下溶解于无水乙醇中，离心除杂得乙醇上清液，将乙醇上清液在温度50-60℃下真空旋转蒸发除乙醇，得水溶性类胡萝卜素纯品；

所述黑附球菌为黑附球菌LS10H已被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏编号：CGMCC No.13871；保藏日期：2017年06月06日；保藏地点：中国科学院微生物研究所。

2.根据权利要求1所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，所述PDA培养基，组分为马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，去离子水1000mL，pH6.7-7.2。

3.根据权利要求1所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，所述发酵培养基为固态培养基或液态培养基。

4.根据权利要求3所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，所述固态培养基，组分为大米10-40g，ZnSO₄ 0.01-0.05 g，NaCl 0.5-1g/L，K₂HPO₄ 0.2-0.5g/L，MgSO₄0.3-0.6g/L，去离子水10-40mL，pH 4-6。

5.根据权利要求3所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，所述液态培养基，组分为葡萄糖20-40g/L，蛋白胨5-10g/L，酵母膏2-6g/L，KH₂PO₄ 0.5-1.5g/L，MgSO₄0.3-0.6g/L，pH3-7。

6.根据权利要求1所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法，其特征在于，所述离心条件为转速4000r/min，离心时间30min。

7.一种水溶性类胡萝卜素，其特征在于，采用权利要求1-6任一项所述的水溶性类胡萝卜素发酵制备方法制备而成。

8.根据权利要求7所述的水溶性类胡萝卜素，其特征在于，所述水溶性类胡萝卜素在发酵过程中能分泌至细胞外并稳定的存在于发酵基质中。