[发明专利]一种基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法

权利要求书

1.一种基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将待鉴别的药材木通藤茎切细段浸泡于乙醇溶液中进行固定，然后采用铬酸-硝酸离析法进行离析处理；

2)将经步骤1)处理后的药材洗涤、离心，取沉淀物，将沉淀物浸没于乙醇溶液中制成悬浮液，保存备用；

3)制备临时装片；

4)将经步骤3)制好的临时装片染色处理后，在SEM下观察，并拍照记录药材的管状分子穿孔板类型、纹孔膜特征、导管纹孔试样及口径长度；

5)当观察结果满足：

第一，95％以上的导管端壁为单穿孔板类型，5％的为梯状穿孔板，端壁穿孔板具有短喙；

第二，若侧壁穿孔板为梯状，其端壁为单穿孔平截无尾；

第三，纹孔膜仅出现在管胞状导管的端壁；

第四，导管的纹孔式样为互列式；

第五，口径长度为30～60μm；

则判断该药材为三叶木通。

2.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中，所述固定是将木通藤茎切成长度为0.8～2cm的小段，浸入浓度为70％的乙醇溶液中固定40～60h。

3.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤1)中，所述离析处理是将固定后的材料浸入离析液中，在40～50℃的恒温箱中离析处理24～48h。

4.根据权利要求3所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，所述离析液由质量浓度为10％的硝酸溶液和质量浓度为10％的铬酸溶液等体积混合配制而成；加入的离析液的质量为材料的15～20倍。

5.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤2)中，洗涤是用蒸馏水洗涤；离心是在6000～8000rpm下处理8～12min。

6.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤2)中，将离心后的沉淀物浸没于质量分数为50％的乙醇溶液中。

7.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤2)中，制得的悬浮液保存时间长达6个月。

8.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤3)中，临时装片是吸取1～2滴悬浮液滴于洁净的载玻片上，滴入蒸馏水涂抹均匀，盖上盖玻片，阴干48h。

9.根据权利要求1所述的基于SEM下管状分子特征的三叶木通易混淆品种的鉴定方法，其特征在于，步骤4)中，采用5％的番红溶液进行染色。