[发明专利]一种用于同时检测六种实验动物病原体的基因芯片试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种探针在制备同时检测六种实验动物病原体的基因芯片试剂盒中的应用，该探针含有42条探针，所述的探针为SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.42所示的核苷酸序列，所述的六种实验动物病原体为仙台病毒、小鼠肝炎病毒、弓形虫、支原体、沙门氏菌和鼠痘病毒；

所述基因芯片试剂盒同时检测六种实验动物病原体包括以下步骤：以检测样品的DNA/cDNA为模板，以引物组进行平板PCR扩增，随后用带荧光素标记的随机引物进行标记，标记产物与基因芯片杂交；

所述的引物组包括7对引物，所述的引物组中的上下游引物为SEQ ID NO.43 ~SEQ IDNO.56所示的核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的平板PCR体系中含有检测样品的DNA/cDNA 10μL、引物组1μL、Taq酶2μL、BSA 1μL、Glycerol 5μL、ddH₂O补足100μL。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的平板PCR扩增条件：94℃预变性5min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸150s，循环40次，最后72℃总延伸10min。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述标记步骤中的荧光标记体系含有PCR产物5μL、荧光素标记的随机引物9N 3μL、5×Klenow Buffer 2.5μL、klenow酶1μL、ddH₂O补足25μL。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述标记步骤中的反应条件：37℃ 1.5h，70℃10min。