[发明专利]一种同时快速测定样品中三种赭曲霉毒素总量的方法

权利要求书

1.一种同时快速测定样品中三种赭曲霉毒素总量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1. 样品前处理和QuEChERS净化

准确量取待测样品，然后按照以下（A）步骤操作，获得待测液；

（A）：样品中加入同体积的乙腈和冰乙酸的混合溶剂，混匀，然后加入QuEChERS吸附剂1，混匀，第一次离心分离；取上清液，加入QuEChERS净化剂2，混匀，第二次离心分离；取上清，过有机滤膜；

S2. 制作标准曲线：配制标准工作溶液制作标准曲线，以外标法定量；

S3. 高效液相色谱法检测或液相色谱-串联质谱检测

采用高效液相色谱法或高效液相色谱-质谱串联方法，同时检测步骤S1得到的待测液中赭曲霉毒素A、B、C，根据步骤S2中建立的标准曲线进行定量分析。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3所述高效液相色谱法检测的条件为：Agilent-LC-C18柱(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；柱温：35℃；激发波长315nm(0~35min)、333nm（35~50min），发射波长460nm；流量：1ml/min；进样量：20ul；流动相：A为水-冰乙酸(99:1，V/V)，B为乙腈-冰乙酸(99:1，V/V) ；采用梯度洗脱方式。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序为：0min：35%的溶液A，15min：35%的溶液A，25min：50%的溶液A，35min：50%的溶液A，37min：70%的溶液A，47min：70%的溶液A，50min：35%的溶液A。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3所述液相色谱-串联质谱检测的条件为：

色谱工作条件：Agilent ZORBA-LC-C18柱（3.0mm×150mm，3.5μm）色谱柱；柱温：40℃；流速：0.3ml/min；进样量：20μl；流动相：A为0.1%甲酸，B为乙腈；采用梯度洗脱方式；

质谱工作条件：离子源：电喷雾离子源(ESI)；扫描方式：正离子扫描，MRM模式；毛细管电压5.5kV；离子源温度550℃。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序为：0.5 min：90%的溶液A，2.0 min：10%的溶液A，5.0 min：10%的溶液A，5.10 min：90%的溶液A，10.0 min：90%的溶液A。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在液相色谱-串联质谱检测的过程中，质谱采用多反应监测扫描方式，3种赭曲霉毒素的质谱分析参数如下：

赭曲霉毒素A离子选择参数：母离子为404.100m/z，子离子为239.000m/z，去簇电压为90ev，碰撞能量为32eV；赭曲霉毒素B离子选择参数：母离子为370.000m/z，子离子为205.000m/z，去簇电压为79ev，碰撞能量为29eV；赭曲霉毒素C离子选择参数：母离子为432.100m/z，子离子为239.000m/z，去簇电压为113ev，碰撞能量为37eV。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中乙腈和冰乙酸的混合溶剂中乙腈和冰乙酸的体积比为8～10：1。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中所述QuEChERS吸附剂1的配方为：重量比为2～3：1：1：0.1～1的无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠二水合物和柠檬酸氢二钠盐倍半水合物的混合物；所述QuEChERS净化剂2的配方为：重量比为1：1：4～6的C18、SiO₂和MgSO₄的混合物。