本发明公开了一种同时检测较小拟毛刺线虫和肾状拟毛刺线虫的试剂盒。本发明公开了一组可同时检测较小拟毛刺线虫和肾状拟毛刺线虫的引物组,包括上游引物PmF、上游引物PrF和下游引物PR,序列依次如SEQ ID NO.1~3所示。利用该引物组可以从多种毛刺线虫中特异性的同时检测出较小拟毛刺线虫和肾状拟毛刺线虫,不仅能够实现较小拟毛刺线虫和肾状拟毛刺线虫的同时检测,有效克服了检测工作量大和检测成本高的缺点,而且可达到1/100条线虫的检测灵敏度,对实际应用工作,如检验检疫工作,有着重要的推进意义。
本发明提供了引物对和内标扩增序列,所述引物对包含SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,所述内标扩增序列包含SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。本发明还提供了所述的引物对及内标扩增序列在制备检测或辅助检测拟态弧菌的产品中的应用;以及基于RPA‑IAC技术的检测拟态弧菌的方法。经实验证明,本发明的RPA‑IAC引物特异性好、灵敏度高、检测时间短、不需要特殊的仪器和适用范围广,且基于该引物并配合扩增内标建立的拟态弧菌的RPA‑IAC检测方法灵敏、准确、简便和快速,对进出口相关货物及产品检疫具有指导意义。