[发明专利]RAA荧光法检测布鲁氏杆菌的探针及试剂盒在审
申请号: | 201711294177.7 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN108048584A | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
发明(设计)人: | 吴斌;苏立明;张琳;马嗣同;郭利川;王智宏;应清界 | 申请(专利权)人: | 吴斌;江苏奇天基因生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;G01N21/64;C12R1/01 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 刘慧娟;李馨 |
地址: | 116000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | raa 荧光 检测 布鲁氏 杆菌 探针 试剂盒 | ||
1.RAA荧光法检测布鲁氏杆菌的探针,其特征在于,
所述探针为5’端序列/荧光报告基团//idSp//淬灭基团/3’端序列;其中:
所述5’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述3’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
所述idSp为1个碱基空位;
所述荧光报告基团选自FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5中的任一种;
所述淬灭基团选自TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL中的任一种。
2.一种布鲁氏杆菌RAA荧光法检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的探针以及下述引物:上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根据权利要求2所述的布鲁氏杆菌RAA荧光法检测试剂盒,其特征在于,所述的探针终浓度为0.02-0.05mM,所述上游引物及下游引物终浓度为0.05-0.1mM。
4.根据权利要求2所述的布鲁氏杆菌RAA荧光法检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括试剂RAA基础荧光通用反应试剂和反应缓冲液。
5.根据权利要求4所述的布鲁氏杆菌RAA荧光法检测试剂盒,其特征在于,所述反应缓冲液包括:使用浓度为450mM的Tris-HCl Buffer;260mM的MgAc;20%W/V的PEG 10000。
6.根据权利要求2所述的布鲁氏杆菌RAA荧光法检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括如下试剂:阴性质控品、阳性质控品和/或临界阳性质控品;
所述阳性质控品含为布鲁氏杆菌的基因组DNA片段,使用浓度为1.0×10
所述临界阳性质控品为含布鲁氏杆菌的基因组DNA片段,使用浓度为1.0×10
所述阴性质控品为不含有布鲁氏杆菌的基因组片段的试剂。
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