[发明专利]植物缩合单宁高聚体的提取方法有效
申请号: | 201711277250.X | 申请日: | 2017-12-06 |
公开(公告)号: | CN107936265B | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
发明(设计)人: | 周海超;韦萍萍;雷安平;胡章立;李凤兰;杨琼 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C08H7/00 | 分类号: | C08H7/00 |
代理公司: | 深圳青年人专利商标代理有限公司 44350 | 代理人: | 吴桂华 |
地址: | 518060 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 缩合 单宁 高聚体 提取 方法 | ||
1.一种植物缩合单宁高聚体的提取方法,其特征在于,包括下述步骤:
S1选取适量清洗干净的红树科角果木成熟叶片,在-40至-50℃的温度条件下冷冻干燥处理72小时以上后,研磨均匀;
S2 取上述研磨后的样品,以0.2g/mL的质量体积比加入70%丙酮水溶液,所述丙酮水溶液含0.25%抗坏血酸,超声提取30-40 min后离心处理,离心速率为19000-20000g;然后收集上清液,余下沉淀部分以相同条件重复至少两次上述加入70%丙酮水溶液、超声提取和离心处理的操作;
合并上述至少三次离心处理所得的上清液,在不高于30℃的条件下旋转蒸发,以去除有机溶剂--丙酮,得到单宁粗提液;
S3 在单宁粗体液中依次加入等体积的正己烷、石油醚,萃取去脂,每个试剂至少重复二次,剩下的水相部分在不高于30℃的温度下旋转蒸发去除有机溶剂,再投入冻干机内,在-40至-50℃的温度条件下冷冻干燥处理72小时以上,得到单宁粗提物;
S4 将上述粗提物溶于蒸馏水中,然后上50×1.0 cm的Sephadex LH-20 凝胶色谱柱,依次用300 mL的蒸馏水、1000 mL 60%甲醇溶液、400 mL 100%甲醇溶液、200 mL 70%丙酮溶液冲洗;
S5 将上述步骤中蒸馏水、60%甲醇溶液、100%甲醇溶液的洗脱液回收,收集70%丙酮溶液的洗脱液,得到缩合单宁高聚体F,再过15×1.0cm的 Sephadex LH-20 凝胶色谱柱,依次用50 mL混合液A→丙酮:甲醇:水=10:80:10,混合液B→丙酮:甲醇:水=20:60:20,混合液C→丙酮:甲醇:水=70:0:30冲洗该Sephadex LH-20 凝胶色谱柱,分别收集得到缩合单宁高聚体F1、F2、F3。
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