[发明专利]一种用于检测肠腺病毒的引物、探针和试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测肠腺病毒的引物、探针和试剂盒，属于生物技术领域。所述引物和探针包括：用于检测肠腺病毒的正向引物、用于检测肠腺病毒的反向引物和用于检测肠腺病毒的探针。所述试剂盒包括上述的引物和探针。所述引物、探针和试剂盒，具有灵敏度高的特性，能够准确检测样品是否感染肠腺病毒。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种用于检测肠腺病毒的引物、探针和试剂盒。

背景技术

腺病毒是一种常见的病毒感染，有许多不同的临床表现，有时临床症状很独特，可以作明确的诊断，然而大多数的病例，腺病毒引起的症状很难跟其它病原引起的作区分。腺病毒最常造成呼吸道及肠胃道的感染。

1981年以来，国外Kidd、Takiff等最早从腹泻病人粪便中分离出肠道型腺病毒(EAD)，以后DeTong用限制性内切酶分析EAD，发现其有两种不同电泳图谱，名为Ad-40及Ad-41。腺病毒胃肠炎广泛分布于全世界，检出率为5％～14％，其中Ad-40和Ad-41占70％左右。

腺病毒胃肠炎的最小发病年龄为1个月，绝大多数发生于3岁以下的婴幼儿。Ad-40主要感染1岁左右婴儿，Ad-41则感染稍大的幼儿，全年均可发病，但腺病毒性胃肠炎一般呈散发性。

腺病毒胃肠炎的潜伏期约10天，主要表现为腹泻，量少或多，呈水样便或稀便，少数患者可排出粘液，病程4～8天，常伴呕吐。部分患者有呼吸道症状，少数患者发热，病程多自限，排毒时间约1周。某些患者失水较严重，个别重度失水者可死亡。

由于对这一病毒的致病作用不够重视，尚无常规细胞培养。诊断本病虽可采用DNA限制性内切酶检测法，但此法有一定局限性，不易推广。有人认为采用聚丙烯胺凝胶电泳法既能检测Ad，又可检测粪便中轮状病毒，敏感度高于电镜。

对腺病毒性胃肠炎的治疗主要是对症治疗，可口服世界卫生组织推荐的口服补液盐，必要时给予静脉补液。

发明内容

为了解决现有技术中抗体检测不准确的问题，本发明实施例提供了一种用于检测肠腺病毒的引物、探针和试剂盒。所述技术方案如下：

一方面，本发明实施例提供了一种用于检测肠腺病毒的引物和探针，所述引物和探针包括：用于检测肠腺病毒的正向引物、用于检测肠腺病毒的反向引物和用于检测肠腺病毒的探针，其中，

所述用于检测肠腺病毒的正向引物如序列表中SEQ ID NO.1所示；

所述用于检测肠腺病毒的反向引物如序列表中SEQ ID NO.2所示；

所述用于检测肠腺病毒的探针如序列表中SEQ ID NO.3所示；

所述探针的5’端连接有荧光基团FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5，所述探针的3’端连接有淬灭基团TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。

另一方面，本发明实施例提供了一种用于检测肠腺病毒的试剂盒，所述试剂盒包括上述的引物和探针。

具体地，所述试剂盒还包括：核酸释放剂、PCR反应液、临界阳性质控品、阳性质控品、阴性质控品和工作标准品。

具体地，所述工作标准品包括：工作标准品1、工作标准品2、工作标准品3和工作标准品4，其中，

所述工作标准品1为1×107拷贝/mL的所述肠腺病毒的基因片段；

所述工作标准品2为1×106拷贝/mL的所述肠腺病毒的基因片段；

所述工作标准品3为1×105拷贝/mL的所述肠腺病毒的基因片段；