[发明专利]亚精胺三盐酸盐介导核酸纳米材料自组装方法及采用该方法制备的三棱柱的纳米制剂和应用有效
申请号: | 201711210045.1 | 申请日: | 2017-11-28 |
公开(公告)号: | CN108113961B | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 钱航;王栋;王关嵩;刘倩;贺斌峰 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院 |
主分类号: | A61K9/00 | 分类号: | A61K9/00;A61K31/7088;A61K47/26;A61P35/00;A61P11/00 |
代理公司: | 重庆志合专利事务所(普通合伙) 50210 | 代理人: | 胡荣珲 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纳米材料 核酸 自组装 制备 纳米制剂 三盐酸盐 三棱柱 亚精胺 介导 退火 细胞 可用 抑制肿瘤细胞 制备治疗肺癌 生物学效用 有效地 血清 摄取 增殖 肺癌 应用 生长 携带 调控 治疗 运输 | ||
1.一种亚精胺三盐酸盐介导核酸纳米材料自组装的方法,其特征在于,有方法如下:
1)取需合成纳米材料的DNA冻干粉,分别加H2O稀释,混匀,得到DNA溶液;
2)DNA溶液中加入亚精胺三盐酸盐水溶液,混匀, DNA溶液均按需要组装核酸的数量设置摩尔比,在亚精胺三盐酸盐水溶液中梯度退火或恒温或慢退火下介导核酸纳米材料的自组装合成;
所述的恒温为37°C或45℃,恒温下放置30~90 min;
所述梯度退火合成为,95°C放置5 min, 65°C放置30 min,50°C放置30 min,37°C放置30 min, 22°C 放置30 min;
所述慢退火合成为,密封DNA溶液,放入100℃的水中缓慢降温,两天降至室温;
所述亚精胺三盐酸盐水溶液的pH值为6.0-10.0;
所述亚精胺三盐酸盐水溶液的浓度范围50μM-300μM。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤2)采用亚精胺三盐酸盐水溶液介导核酸纳米材料制备三棱柱纳米材料时,用梯度退火后得到半三棱柱结构溶液;将两份半三棱柱结构溶液混合,37°C放置60 min,然后在 22°C 放置30min。
3.采用权利要求1-2任一所述方法制备的携带siRNA的三棱柱的纳米制剂,其特征在于:所述的纳米材料由序列如SEQ ID NO:2所示的P1、序列如SEQ ID NO:3所示的P2、序列如SEQ ID NO:4所示的P2’, 在恒温下或梯度退火或慢退火下,通过单链分子碱基互补配对合成,所述的P1、P2、P2’ 的摩尔比2:3:3,mTOR siRNA、P1、P2、P2’的摩尔比为6:2:3:3。
4.权利要求3所述的纳米制剂的制备方法,其特征在于,有以下步骤:
1)取P1、P2、P2’的冻干干粉,分别加H2O稀释,混匀,得到P1、P2、P2’溶液;
2)取P1、P2与P1、P2’溶液均按照1:3的比例在亚精胺三盐酸盐水溶液中分别化合,DNA三棱柱在恒温下或梯度退火或慢退火合成,得到P1、P2、P2’的摩尔比为2:3:3的纳米材料溶液,将mTOR siRNA添加到纳米材料溶液中,再次放置30 min,得到mTOR siRNA、P1、P2、P2’的摩尔比的纳米制剂溶液。
5.权利要求3所述的制剂在制备治疗肺癌的药物中的应用。
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