[发明专利]一种关节假体感染诊断试剂盒有效
| 申请号： | 201711205459.5 | 申请日： | 2017-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN108034735B | 公开（公告）日： | 2021-02-23 |
| 发明（设计）人： | 彭兆祥;李瑾;郑慷;林杰;王思佳 | 申请（专利权）人： | 宁波市医疗中心李惠利医院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12N15/11;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 杭州知见专利代理有限公司 33295 | 代理人： | 赵越剑 |
| 地址： | 315000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 节假 感染 诊断 试剂盒 | ||
1.一种关节假体感染诊断试剂盒，其特征在于，包括引物、无镁离子PCR反应缓冲液、MgCl2、Taq 聚合酶、dNTP混合物及ddH2O，所述引物包括通用引物、特异性引物及内参引物，所述特异性引物组成如下：
ica D基因检测引物：上游引物5'-ATCGTTGTGATGATTGTTTA-3'和下游引物5'-GATATGTCACGACCTTTCTT-3'；
eno基因检测引物：上游引物5'-ACGTGCAGCAGCTGACT-3'和下游引物5'-CAACAGCATYCTTCAGTACCTTC-3'；
sar A基因检测引物：上游引物5'-CATCAGCGAAAAGAGAAA-3'和下游引物5'-TGTTTGCTTCAGTAATTCGTTT-3'；
agr基因检测引物：上游引物5'-GCGCCATAGGATTGTAGAGTG-3'和下游引物5'-CTCAGTAAGAATCCATTTCGCCC-3'；
Mec A基因检测引物：上游引物5'-TATTAGGTTATGTTGGTCCC-3'和下游引物5'-TGTATGTGCGATTGTATTGC-3'；
Mre B基因检测引物：上游引物5'-GGGTCGTACACCTGGTAACATT-3'和下游引物5'-GAACTTCATCACCTGGGTAAGC-3'；
所述通用引物为16s rRNA基因检测引物：
上游引物5'-TCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTA-3'，
下游引物5'-GGTTTCGCTGCCCTTTGTATTGT-3'。
2.根据权利要求1所述的一种关节假体感染诊断试剂盒，其特征在于，所述内参引物为gyrB基因检测引物：
上游引物5'-TTATGGTGCTGGACAGATACA-3'，
下游引物5'-CACCGTGAAGACCGCCAGATA-3'。
3.根据权利要求1所述的一种关节假体感染诊断试剂盒，其特征在于，所述关节假体感染诊断试剂盒检测时的检测反应体系如下：
模板3μL，
10×无镁离子PCR反应缓冲液 5μL，
dNTP混合物3μL，浓度各200μmol/L；
MgCl2 3μL，浓度1.5mmol/L；
Taq 聚合酶0.25μL，浓度10U/μL；
目的基因的上游引物2μL，浓度10pmol/L；
目的基因的下游引物2μL，浓度10pmol/L；
gyrB基因检测引物的上游引物2μL，浓度10pmol/L；
gyrB基因检测引物的下游引物2μL，浓度10pmol/L；
ddH2O补足至50μL。
4.根据权利要求3所述的一种关节假体感染诊断试剂盒，其特征在于，目的基因的上游引物及下游引物选自16s rRNA基因检测引物、ica D基因检测引物、eno基因检测引物、sarA基因检测引物、agr基因检测引物、Mec A基因检测引物、Mre B基因检测引物的中的一种。
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