[发明专利]一种纳豆激酶片剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及含有来自植物的医用配制品，尤其是一种纳豆激酶片剂的制备方法。

背景技术

纳豆起源于中国，自中国秦汉（公元前221年-公元220年）以来开始制作，由黄豆通过纳豆菌（枯草杆菌）发酵制成豆制品，具有黏性，气味较臭，味道微甜，不仅保有黄豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率，更重要的是发酵过程产生了多种生理活性物质，具有溶解体内纤维蛋白及其他调节生理机能的保健作用。纳豆富含多种营养素，常吃可以预防便秘、腹泻等肠道疾病，提高骨密度，预防骨质疏松，还可以双向调节血压，溶解陈旧血栓斑块，调节血脂，能消除疲劳，综合提高人体免疫力。纳豆尽管具有较好的保健功效，但是由于其可能存在过度发酵产生氨味，使得其难以得到推广。

发明内容

为了克服现有技术中纳豆过度发酵存在氨味的不足，本发明的目的是提供一种工艺合理、技术可靠纳豆激酶片剂的制备方法，利用该制方法得到一种纳豆激酶活性较高的保健食品。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

（1）将大豆浸泡15-20小时，并且在0.10-0.15MPa的压力下蒸煮30-40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0-1.5；

（2）在80-90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37-40摄氏度下发酵20-24小时；

（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4-8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；

（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；

（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；

（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。

在本发明优选的方面，在步骤1中，将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2。

在本发明优选的方面，在步骤2中，在发酵之前，向发酵混合物中加入酪氨酸钠盐达到25-50g/L，磷酸氢二钠达到10-15g/L，葡萄糖达到30-60g/L，大豆蛋白粉达到20-40g/L。

在本发明优选的方面，在步骤2中，在发酵了16-18小时之后，在发酵混合物中加入乙醇达到40-60 g/L并且继续发酵。

在本发明优选的方面，在步骤2中，接种枯草芽孢杆菌的量为1.0-10×10⁸CFU/g。

在本发明优选的方面，在步骤2中，在85摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在38摄氏度下发酵22小时。

在本发明优选的方面，在步骤3中，将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:5，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清。

在本发明优选的方面，在步骤5中，使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液。

在本发明优选的方面，在步骤6中，所述的赋形剂为淀粉。

本发明的方法实现了清新无味的纳豆激酶片剂的制备，其制备方法工艺合理、技术先进可靠，并且纳豆激酶活性较高。该方法可以广泛用于纳豆产品的深加工和保健品的制备。

具体实施方式

除非另外地说明，在步骤2中，接种枯草芽孢杆菌的量为4.0×108CFU/g。该枯草芽孢杆菌的菌种购自沧州华雨生物科技有限公司。

除非另外地说明，在步骤6中的压片工序中都压制成0.200g的药片，并且按照每千克纳豆原料压制200片的数量来进行辅料的加入和压片。

实施例1

在本实施例中，从10千克大豆开始进行实施。具体地，一种纳豆激酶片剂的制备方法，其包括以下步骤：

（1）将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2；

（2）在85摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在38摄氏度下发酵22小时；