[发明专利]一种纳豆激酶片剂的制备方法

权利要求书

1.一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

（1）将大豆浸泡15-20小时，并且在0.10-0.15MPa的压力下蒸煮30-40分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.0-1.5；

（2）在80-90摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在37-40摄氏度下发酵20-24小时；

（3）将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:4-8，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清；

（4）将步骤3得到的清液进行超过滤，并且收集排阻相对分子量为10000以上的物质，得到超滤浓缩液；

（5）使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7-8，浓度为0.08-0.12mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液；

（6）将步骤5得到的浓缩液冻干得到粉末，随后加入赋形剂压制成片剂。

2.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤1中，将大豆浸泡18小时，并且在0.12MPa的压力下蒸煮36分钟，蒸煮完毕后除去部分液体使得大豆和液体的重量比为1：1.2。

3.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤2中，在发酵之前，向发酵混合物中加入酪氨酸钠盐达到25-50g/L，磷酸氢二钠达到10-15g/L，葡萄糖达到30-60g/L，大豆蛋白粉达到20-40g/L。

4.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤2中，在发酵了16-18小时之后，在发酵混合物中加入乙醇达到40-60 g/L并且继续发酵。

5.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤2中，接种枯草芽孢杆菌的量为1.0-10×10⁸CFU/g。

6.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤2中，在85摄氏度的无菌条件下接种枯草芽孢杆菌并且在38摄氏度下发酵22小时。

7.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤3中，将步骤2发酵得到的纳豆发酵混合物中加入清水，直到纳豆和液体的重量比为1:5，随后进行匀浆，随后离心并且收集上清。

8.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤5中，使用葡聚糖凝胶G-50柱进行柱层析：使用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液平衡并且装柱，取步骤4的超滤浓缩液来上样，随后用pH为7.5，浓度为0.10mol/L的磷酸钠缓冲液冲洗；收集洗脱液，渗析除盐，得到浓缩液。

9.根据权利要求1所述的一种纳豆激酶片剂的制备方法，其特征在于：在步骤6中，所述的赋形剂为淀粉。