[发明专利]一种利用水产品加工副产物生产生物活性钙益生菌的方法及其应用

说明书

【技术领域】

本发明属于水产品加工副产物资源化利用领域，特别涉及一种水产品加工副产物鱼骨和鱼头发酵制备含生物活性钙益生菌的方法。

【背景技术】

鱼富含蛋白质、VA、VE、矿物质和微量元素等，其营养价值比鸡肉和牛肉高得多；深海鱼类还含有丰富的EPA和DHA，具有降低血脂、抗动脉硬化、抗血栓、为大脑补充必要的营养元素等功效。鱼具有高蛋白、低脂肪、低热量、营养丰富、味道鲜美等特点备受消费者青睐。但是鱼加工中的鱼骨和鱼头作为废弃物乱扔不但污染环境，还是对资源的一种浪费。鱼骨，例如鳗鱼脊椎骨被公认为“理想的天然生物钙源”，其钙磷比例接近2:1，与母乳天然吻合，是国际公认的钙质吸收最佳比例，钙质的生物利用率高。

鱼类蛋白质水解除包括部分人体必需的氨基酸外，几乎含有构成蛋白质分子的全部氨基酸(刘达玉等.不同工艺制备骨汤及其成分分析[J].食品科技,2015,40(7)：146-150)，将低值鳗鱼骨和鳗鱼头中含有的丰富蛋白质、氨基酸、微量元素等营养物质，通过化学或生物的方法加工成鳗鱼提取物产品，可大大提高其经济价值和附加值。张鹏等(利用低值鳗鱼骨开发鳗鱼提取物的研究[J].食品科技,2016,41(12)：93-96)用风味蛋白酶和复合蛋白酶酶解鳗鱼骨并结合美拉德反应制成鳗鱼提取物调味品。潘爱国(潘爱国.一种从满鱼骨中提取的鳗鱼小分子肽及其提取方法[P].CN201510961837.7)用复合酶酶解鳗鱼骨提取小分子肽。曾丽丽(曾丽丽.一种鳗鱼鱼骨软糖及其制备方法[P].CN201611017944.5)用鳗鱼骨粉制成夹心软糖。

本发明把水产品加工副产物鱼头和鱼骨(或其它)制成糊代替MRS液体培养基中的氮源(蛋白胨、牛肉膏)以及钙盐和磷盐发酵乳酸益生菌，同时乳酸菌产生的乳酸能够提取鱼骨中的钙，钙与发酵体系中的小肽和氨基酸螯合反应生成生物鱼骨活性钙，从而发酵结束后可获得含鱼骨活性钙的益生菌，可以广泛用于食品和保健品行业。

【发明内容】

【发明目的】

本发明旨在提供一种用水产品加工副产物鱼骨或鱼头发酵制备含生物活性钙益生菌的方法及其产品。这一发明将有助于解决鱼骨和鱼头深加工技术低端化，工艺复杂化，产品单一化等问题，为我国鱼骨和鱼头深加工产业提供技术参考。同时提供的含鱼骨活性钙益生菌可以广泛用于食品和保健行业。

【本发明的技术方案】

本发明所述的一种含鱼骨生物活性钙益生菌的制备方法包括如下步骤：

1)取水产品加工的副产物鱼头或鱼骨洗净、不放水直接用高压锅蒸20min后，冷却用粉碎机粉碎成糊状；

2)将步骤1)中制得的糊替代MRS培养基中的蛋白胨与牛肉膏与MRS培养基(不含蛋白胨、牛肉膏)混合均匀，再在105℃灭菌20分钟冷却后按种子液与发酵体系体积比为1-5％接入乳酸菌单菌(如：双歧杆菌，保加利亚乳杆菌，嗜热链球菌，干酪乳杆菌或嗜酸乳杆等)或其混菌进行35℃发酵48h；

3)发酵结束后，加入预先配制好的冻干保护剂，混匀后快速冷冻再真空冷冻干燥24—48h获得含生物活性钙益生菌。

【本发明的优点】

本发明旨在提供一种利用水产品加工副产物生产生物活性钙益生菌的方法。这一发明具有如下优点：

1)采用本发明提供的技术方案，用菌直接发酵鱼骨和鱼头，利用发酵过程产生的乳酸提取钙，提取的游离钙与发酵体系中的多肽和氨基酸螯合成生物活性钙，这一工艺集成了发酵、提取和螯合反应的技术，工艺简单，可操作性强，免去中间的分离过程，大大降低了经济成本；

2)本发明通过技术集成，充分利用鱼骨和鱼头，提取了鱼骨钙还获得益生菌，实现了鱼骨和鱼头的高附加值资源化利用。

总之，这一发明将有助于解决鱼骨和鱼头深加工技术低端化，工艺复杂化，产品单一化等问题，为我国鱼骨和鱼头深加工产业提供技术参考。

【具体实施方法】

实施例1

将500克鳗鱼骨和鳗鱼头洗净，用高压锅蒸1小时，冷却粉碎成糊状；将上述鳗鱼骨糊加至1L MRS(不含蛋白胨与牛肉膏)培养基中，混合均匀，105℃灭菌20min，冷却至室温。

将用甘油管保存的乳酸菌接到MRS液体培养基上进行活化，重复3-5次以充分恢复菌株活力。菌株充分活化后，分别以接种量体积比为5％的比例分别接入MRS液体培养基，于35℃培养16h得到种子液。

将双歧杆菌种子液以体积比为5％的接种量接入上述鳗鱼骨MRS培养基中，35℃发酵48h。