[发明专利]一种用于防治人参锈病的微生物菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于防治人参锈病的微生物菌剂及其制备方法和应用，涉及微生物技术领域，微生物菌剂的组成成分及其重量百分比为：生防菌剂0.1‑10%，腐殖酸5‑30%，蘑菇渣25‑65%，豆粉5‑30%；生防菌为枯草芽孢杆菌与甲基营养型芽孢杆菌；本发明还提供了一种用于防治人参锈病的微生物菌剂的制备方法和应用，微生物菌剂的制备包括菌种培养、种子罐发酵培养、大规模工业发酵培养、枯草芽孢杆菌菌剂与甲基营养型芽孢杆菌菌剂的制备、生防菌剂的制备与微生物菌剂的制备。本发明提供的微生物菌剂具有适应性强、稳定性好、增殖速度快及对病原菌拮抗性强等特点，且协同效果显著，应用于人参锈病的防治过程，对病原菌抑制率可达到80%以上。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种用于防治人参锈病的微生物菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

微生物菌剂是针对作物栽培和育苗移载面积扩大，连作重茬增多，农作物病虫害日趋严重等问题，利用高新生物技术研制而成的新型生物抗病菌肥。微生物菌剂属于活菌制剂，具有活性强、代谢产物多、生防效果好、对人、畜、农作物和自然环境安全，以及不易产生抗药性等优点，广泛应用于经济作物种植、禽畜粪便腐熟、工业废弃物处理、环境改良等领域。目前市场上较为成熟的微生物农药产品，有苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等。

人参是我国名贵中药材，随着其在食品、药品、保健品等行业的广泛应用，市场需求量与日俱增，但土传病害严重制约着人参的质量和产量，影响其发展进程。人参锈病是人参生长过程中发生最普遍、危害最严重的根茎部病害之一，该病症由土壤传染的病原真菌引起，严重影响人参的质量和产量，而且在栽种过人参的土壤中发病尤为严重，连作障碍已成为人参种植中的主要障碍之一。

目前，对人参锈病的防治主要以化学防治为主，通常采用喷洒多菌灵、扑海因和杀毒矾等农药来进行防治，但这些方法多存在效果不稳定、易产生抗药性、有化学残留及污染环境等弊端，影响人参的质量和产量。因此，利用微生物菌剂对人参锈病进行防治，可在有效防治人参锈病的基础上，减少化学农药的使用，降低化学农药对土壤的污染；同时有效降低因化学农药作用而导致的病原菌抗药性的增强，保护土壤微生态系统平衡，改善人参生存环境并提高其抗病能力，对人参增产和品质提高有着重要意义。

发明内容

根据现有技术中存在的技术缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种用于防治人参锈病的微生物菌剂及其制备方法和应用，解决化学防治措施存在的效果不稳定、易产生抗药性、有化学残留、污染环境，以及影响人参的质量和产量等问题。

为了实现本发明的技术目的，本发明一种用于防治人参锈病的微生物菌剂及其制备方法和应用的技术方案是：

一种用于防治人参锈病的微生物菌剂，所述微生物菌剂的组成成分及其重量百分比为：生防菌剂0.1-10%，腐殖酸5-30%，蘑菇渣25-65%，豆粉5-30%。

作为本发明的进一步改进，所述生防菌剂的生防菌为枯草芽孢杆菌与甲基营养型芽孢杆菌。

作为本发明的进一步改进，所述微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：

（1）菌种培养：将低温保存的所述枯草芽孢杆菌与所述甲基营养型芽孢杆菌菌株分别接种于NA固体培养基上，培养得到单菌落，挑取单菌落转接到NA斜面培养基上继续培养；挑取长势良好的单一菌落，接种至LB培养基中，振荡培养得到一级种子液；

（2）种子罐发酵培养：将步骤（1）得到的所述一级种子液，按种子罐所用培养基体积比的0.5-3％接种量分别接入种子罐，培养得到二级种子液；

（3）大规模工业发酵培养：将步骤（2）得到的所述二级种子液，按大规模工业发酵罐所用培养基体积比的5-10％接种量分别接入大规模工业发酵罐，完成发酵，得到最终生物量≥150亿/ml，芽孢形成率达98％以上的枯草芽孢杆菌发酵液与甲基营养型芽孢杆菌发酵液；