[发明专利]肝素酶冻干制剂、肝素酶杯及其制备方法和用途

说明书

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种肝素酶冻干制剂、肝素酶杯及其制备方法和用途。本发明提供的肝素酶冻干制剂的复溶酶活收率至少为75％。本发明提供的肝素酶杯，包括：杯体和肝素酶冻干制剂，所述杯体内限定出容纳空间；所述肝素酶冻干制剂设置在所述容纳空间中。本发明还提供了一种肝素酶冻干制剂的方法，包括：将含有预定比例的所述肝素酶、所述保护剂、所述缓冲盐和所述防腐剂的水溶液依次进行预冻处理、升华处理和干燥处理，以便获得所述肝素酶冻干制剂。将本发明肝素酶冻干制剂和肝素酶杯应用在血液样本的检测过程中，其检出灵敏度高，而且能够显著提升肝素酶在冻干过程中的活性和稳定性。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种肝素酶冻干制剂、肝素酶杯及其制备方法和用途。

背景技术

肝素酶是一类能够特异性裂解肝素和类肝素主链糖苷键的酶，肝素酶的应用十分广泛，如清除血液中残存肝素、防止凝血、生产低分子量肝素、研究肝素的结构。另外，肝素酶可以用于血液样本的生化检测例如血栓弹力图。

然而，目前的肝素酶制剂仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种能够同时满足有效保持酶活、保存效期长且灵敏感高的肝素酶冻干制剂和肝素酶杯，尤其是提供了一种用于血液检测的肝素酶杯的制备方法。

血液凝固过程的最终结果是形成血凝块；血凝块的物理性质(血凝时间、速率、血块强度)将决定病人是否具有正常的凝血功能，是否会出血或形成血栓；肝素类药物可增加血液中抗凝血酶的活性，从而起到抗凝作用。本发明的发明人在研究过程中发现，借助于血栓弹力图检测时，普通杯中无肝素酶，因此血凝时间会受到肝素的影响；肝素酶杯中包被有肝素酶，可有效降解血液中的肝素，不受残留肝素影响。通过将普通杯血栓弹力图曲线和肝素酶杯血栓弹力图曲线叠加，对比凝血时间，即可评估肝素治疗前后全血的凝血功能。

因此，在肝素酶杯的生产过程中如何在生产过程中保持肝素酶的活性，不造成酶活的严重损失，降低产品成本同时对肝素检出敏感，是一个关键的问题。发明人进行了一系列的实验探索和研究，以期寻找出一种能够同时满足对酶活影响小、显著延长肝素酶杯保存效期对肝素检出敏感的肝素酶冻干制剂，除肝素酶以外，含有保护剂以及防腐剂等成分，而且用于肝素的检测，其检出灵敏度高，能够显著提升肝素酶在冻干过程中的活性和稳定性。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种肝素酶冻干制剂，所述肝素酶冻干制剂的复溶酶活收率至少为75％。

肝素酶能够特异性裂解肝素和类肝素主链糖苷键，其应用十分广泛，如清除血液中残存肝素、防止凝血、生产低分子量肝素、研究肝素的结构。肝素酶是一种很容易失活的酶，可以将其制备成冻干粉提高其稳定性，但因肝素酶比较脆弱，冻干过程酶活损失30％以上，导致肝素酶成本高，限制了其在体外诊断试剂领域的广泛应用。而本发明提供的肝素酶冻干制剂，其复溶酶活收率至少为75％以上，甚至是85％以上，极大的提高了肝素酶的保存活力，可以用于与肝素酶相关的试剂盒的制备中，或者用来制备体外诊断试剂。

另外，根据本发明的上述实施例，上述肝素酶冻干制剂还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述肝素酶冻干制剂的酶活有效期在12个月以上，所述肝素酶冻干制剂在12个月后的酶活损失在10％以下。将本发明提供的肝素酶冻干制剂在2-8℃条件下放置12个月甚至是15个月时，其酶活损失与未放置之前相比，酶活损失在10％以下。放置12个月的酶活损失在6％以下，放置15个月的酶活损失在9％以下，可以极大的满足工业生产的需求。

根据本发明的实施例，所述肝素酶为肝素酶I。肝素酶I冻干制剂，可以保留肝素酶I的活性，冻干前后对比肝素酶I的活性，酶活收率在75％以上。

根据本发明的实施例，所述肝素酶冻干制剂含有：