[发明专利]解淀粉芽孢杆菌Rdx5及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌Rdx5及其应用。

背景技术

水稻是我国乃至全世界最重要的粮食作物之一，全世界超过50％的人口以大米作为主要粮食。近年来随着生活水平的提高，大米的消耗量与需求越来越大，对水稻的产量与质量要求也越来越高。相关研究表示，到2030年时水稻要增产40%才能满足人类对大米的需求。科研工作者们都在致力于高产、抗病水稻品种的研发，但水稻的生产还是受到各种生物与非生物的胁迫，使得产量低于预期，其中就包括稻瘟病菌等引起的水稻病害，使水稻减产严重。稻瘟病是水稻三大病害之一，目前的防治方法主要是抗病品种的选育与化学防治为主， 化学防治效果好速度快方便又经济，已经成为现今最主要的防治措施，但是化学防治容易使稻瘟病菌产生抗药性且污染土壤环境，产生农药残留。所以我们积极的寻找新的防治手段，生物防治及生物农药的研发就变得越来越重要，植物源、微生物源的生物农药具有显著的生物防治特征，与化学防治相比，显得更加的平和，对环境的压力较小，同时由于天然产物的进化关系，抗生素、植物源农药种类繁多，靶点各异，效用因子众多，能够有效减弱稻瘟病菌抗药性对试剂的耐受效果，同时延长产品的使用时间因此，生物农药在未来将会受到更多的重视。因此探索发现能够良好防治稻瘟病，自然环境中可以降解且对人体无害的新的抗菌物质，显得非常的重要与迫切。

发明内容

本发明旨在提供一种解淀粉芽孢杆菌Rdx5，该菌株在Landy培养基，28-30℃培养产生的次生代谢产物对水稻稻瘟病具有强烈的拮抗作用。为水稻稻瘟病的防治提供新的菌株。

为解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现：

菌株Rdx5，分类命名为解淀粉芽孢杆菌，拉丁文学名为Bacillus amyloliquefaciens ，于2017年7月15日保存于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），其保存编号为CCTCCNO: M2017406，保存单位地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内（武汉大学第一附小对面），武汉大学保藏中心。

所述解淀粉芽孢杆菌Rdx5从中药材白芷中分离得到，该菌株在Landy培养基，28-30℃培养产生的次生代谢产物对水稻稻瘟病具有强烈的拮抗作用。

经检验分析，所述次级代谢产物中含有抑制稻瘟病病菌的活性物质，所述活性物质包括有蛋白酶、过氧化物酶、明胶酶、纤维素酶等。这些活性物质通过破坏真菌细胞壁结构造成真菌死亡从而防治水稻稻瘟病。

所述菌株Rdx5生长特性：所述解淀粉芽孢杆菌Rdx5在PDA培养基上生长，有褶皱，菌落圆形，边缘整齐。革兰氏染色后显微镜观察结果：革兰氏阳性菌

所述菌株Rdx5生理生化特性：

所述解淀粉芽孢杆菌Rdx5生理生化特征如下表1所示：

表1：

表2：

注：“+”为阳性，“-”为阴性 , ND表示未测定。

菌株Rdx5的鉴定：通过生理生化鉴定获得菌株Rdx5的生理生化特征，从上表可见：菌株Rdx5芽孢椭圆，3℃不生长，不能利用柠檬酸盐，硝酸盐还原为阳性，氧化酶/吲哚试验/卵黄磷脂酶都为阴性,能水解淀粉，并能利用多种糖醇产酸。参照《伯杰氏细菌鉴定手册（第八版）》、东秀珠版《常见细菌系统鉴定手册》的内容，菌株Rdx5的生理生化与解淀粉芽孢杆菌模式种比较可以鉴定菌株Rdx5为解淀粉芽孢杆菌。部分生理生化鉴定结果与标准的解淀粉芽孢杆菌生理生化特征有差异。例如：菌株Rdx5不能利用阿拉伯糖/木糖产酸，也不能耐受7%NaCl。但是我们又经过细菌的16SrDNA测序NCBI上比对，我们发现菌株Rdx5与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens（登录号：NR 075005.1）具有最高的同源性，在Mega6.0中，将与其有相关性的代表细菌共同建立系统发育进化树，认定其为解淀粉芽孢杆菌。

本发明具有以下有益效果：

本发明从中药材白芷中筛选出菌株Rdx5，该菌株对水稻稻瘟病具有拮抗作用，同时菌株Rdx5的次生代谢产物对水稻稻瘟病也具有强烈的拮抗作用。为稻瘟病防治提供了新的微生物菌种；菌株Rdx5的1倍的发酵液过滤液浓度为0.025mL/mL对稻瘟病菌的抑制率达到了71.76％，抑菌效果好。

附图说明

图1为菌株Rdx5单菌落在PDA培养基上生长的形态图。

图2为菌株Rdx5对稻瘟菌饼的拮抗作用的结果图；