[发明专利]靶向并引导Cas9蛋白高效切割TCR及B2M基因座的sgRNA

权利要求书

1.一种用于制备通用型CAR-T细胞的试剂，其特征在于，所述试剂包括：

(i)靶向TCR的β2链的sgRNA或用于表达所述sgRNA的表达载体，所述sgRNA为选自下组的核苷酸序列：

TRBC2-sgRNA7、TRBC2-sgRNA8；

以及任选的(ii)表达Cas9蛋白或表达Cas9蛋白的表达盒；

其中，所述TRBC2-sgRNA7包括SEQ ID NO.:39所示的sgRNA识别区序列；

所述TRBC2-sgRNA8包括SEQ ID NO.:40所示的sgRNA识别区序列。

2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂还包括选自下组的sgRNA或用于表达所述sgRNA的表达载体，所述sgRNA为选自下组的核苷酸序列：

(A)靶向TCR的α链的sgRNA：

TRAC-sgRNA0、TRAC-sgRNA5、TRAC-sgRNA6、TRAC-sgRNA7、TRAC-sgRNA8、TRAC-sgRNA9、TRAC-sgRNA10、TRAC-sgRNA11、TRAC-sgRNA12、TRAC-sgRNA13、TRAC-sgRNA14、TRAC-sgRNA15、TRAC-sgRNA16、TRAC-sgRNA17、TRAC-sgRNA18、TRAC-sgRNA19、TRAC-sgRNA20；

其中，所述TRAC-sgRNA0包括SEQ ID NO.:1所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA5包括SEQ ID NO.:2所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA6包括SEQ ID NO.:3所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA7包括SEQ ID NO.:4所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA8包括SEQ ID NO.:5所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA9包括SEQ ID NO.:6所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA10包括SEQ ID NO.:7所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA11包括SEQ ID NO.:8所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA12包括SEQ ID NO.:9所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA13包括SEQ ID NO.:10所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA14包括SEQ ID NO.:11所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA15包括SEQ ID NO.:12所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA16包括SEQ ID NO.:13所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA17包括SEQ ID NO.:14所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA18包括SEQ ID NO.:15所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA19包括SEQ ID NO.:16所示的sgRNA识别区序列；

所述TRAC-sgRNA20包括SEQ ID NO.:17所示的sgRNA识别区序列。

3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述靶向TCR的α链的sgRNA选自下组：

TRAC-sgRNA5、TRAC-sgRNA6、TRAC-sgRNA7、TRAC-sgRNA8、TRAC-sgRNA9、TRAC-sgRNA10、TRAC-sgRNA12、TRAC-sgRNA13、TRAC-sgRNA14、TRAC-sgRNA15、TRAC-sgRNA16、TRAC-sgRNA17、TRAC-sgRNA20。