[发明专利]一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法

权利要求书

1.一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）MRS培养基的配制和灭菌：配制MRS液体培养基，并置于灭菌柜中灭菌；

（2）东方醋杆菌的扩大培养：将东方醋杆菌接种到灭菌过的MRS液体培养基中进行扩大培养；

（3）板蓝根、黄芪、党参粗粉的制备：取一定量的板蓝根、黄芪和党参置于烘箱中烘干，然后粉碎、过筛；

（4）配制发酵培养基：配制含有板蓝根、黄芪和党参粗粉的发酵培养基，并置于灭菌柜中灭菌；

（5）接种和发酵：将扩大培养后的东方醋杆菌接种到含有板蓝根、黄芪和党参粗粉的发酵培养基中发酵；

（6）离心：将发酵得到的发酵液离心，并用水洗涤沉淀，再次离心，合并两次离心的上清液；

（7）检测：将离心后的上清液减压浓缩干燥，得干燥物，检测干燥物中的多糖成分含量；

（8）配制：取步骤（7）中的干燥物，添加适量的注射用水，再添加甘露醇，用1%的氢氧化钠溶液调节pH至5.5-6.0，加注射用水至1000ML，用0.22μm的微孔膜过滤器过滤，得兽用复方板蓝根注射液；

（9）灌封：将得到的兽用复方板蓝根注射液用拉丝灌封机灌装、封口，灌装入10ML洁净玻璃安瓿瓶中，每支灌装10.0-10.2ML；

（10）灭菌：将上述灌装封口后的药支送入蒸汽灭菌柜中于100℃蒸汽灭菌30分钟，得成品。

2.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：

所述的步骤（1）中的MRS液体培养基是由下列重量份的原料制成的：酪蛋白酶消化物10份，牛肉膏粉10份，酵母膏粉4份，柠檬酸三铵2份，乙酸钠5份，七水合硫酸镁0.2份，四水合硫酸锰0.05份，磷酸二氢钾2份，葡萄糖2份，吐温-80 1份，其余为蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中灭菌柜的温度是121℃，灭菌时间是20分钟。

4.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：所述的步骤（2）中扩大培养的温度是37℃，初始pH为5.7±0.2，生长周期为24-32h。

5.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：所述的步骤（3）中烘箱的温度为50℃，烘干时间为4小时，粉碎后过40目筛网。

6.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：所述的步骤（4）中发酵培养基是由下列重量份的原料组成的：胰蛋白胨4-6份，酵母粉4-6份，磷酸氢二钾1-3份，磷酸二氢钾1-3份，硫酸镁0.2-1份，黄芪粉20-30份，板蓝根粉20-30粉，党参粉10-20份，其余为蒸馏水；配制好后分装于500ML的三角瓶中，调整初始pH为6.5，于121℃灭菌15分钟。

7.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：

所述的步骤（5）中东方醋杆菌的接种量为1%-3%。

8.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：

所述的步骤（6）中离心机的转速是3500-5000转/分钟，离心时间是5-15分钟。

9.根据权利要求1所述的一种兽用复方板蓝根注射液的制备方法，其特征在于：所述的步骤（7）中的上清液在0.08MP的真空干燥箱中浓缩干燥5小时，烘箱的温度是50℃，多糖成分含量的测定选用间接碘量法。