[发明专利]核酸作为猪的种属鉴定的标志物的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及核酸作为猪的种属鉴定的标志物的应用。

背景技术

在目前动物提取物中，猪所占的比例较大，猪肉可直接当作食品，从猪肝可以提取肝类活性肽，从猪脾中可以提取免疫类活性物质，从猪脑中可以提取脑蛋白活性肽等等，其利用率相当大。因此，需对其来源进行物种鉴别，和其它动物进行一个有效的区分。

随着生物学的不断发展，物种鉴别经历了从肉眼外观的鉴别，血型、特殊蛋白的鉴别，发展到现在利用不同物种之间DNA序列之间的差异，设计引物，使用PCR仪扩增出目的条带并鉴定，从而确定所鉴定材料的物种来源。该方法所需动物样本量少，专一性高，操作简便。并且一个动物其体内所有细胞共用一套遗传信息，提取任何组织的DNA都能确定其种属。

聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对，从而确定其来源。但目前未见其应用于猪的种属鉴定的相关报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供核酸作为猪的种属鉴定的标志物的应用。本发明提供的标志物及鉴定方法简单适用，所需样本量少，时间短，反应灵敏，PCR结果判断清晰，专一性较好，切适用于猪的各类组织鉴定。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了核酸作为猪的种属鉴定中的标志物的应用；所述核酸具有Ⅰ、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一个：

Ⅰ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

Ⅱ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。

在本发明的一些具体实施方案中，所述取代、缺失或添加的核苷酸数量为1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个或15个。

在本发明的一些具体实施方案中，所述应用中采用的待测样本为猪的器官或组织。

在本发明的一些具体实施方案中，所述器官或组织选自肌肉、肝脏、脾脏或脑。

本发明还提供了引物组，其上游引物具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；其下游引物具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。

本发明还提供了所述的引物组在扩增核酸中的应用；所述核酸具有Ⅰ、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一个：

Ⅰ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

Ⅱ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。

本发明还提供了所述的引物组在猪的种属鉴定中的应用。

本发明还提供了一种试剂盒，包括本发明提供的引物组。

本发明还提供了所述的试剂盒在猪的种属鉴定中的应用。

本发明还提供了一种鉴定猪的种属的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：获得猪的待测样本；

步骤2：通过所述的引物组扩增；

步骤3：获得核酸；所述核酸具有Ⅰ、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一个：

Ⅰ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

Ⅱ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。

本发明提供了核酸作为猪的种属鉴定中的标志物的应用；所述核酸具有Ⅰ、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一个：

Ⅰ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

Ⅱ具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。

本发明提供的标志物及鉴定方法简单适用，所需样本量少，时间短，反应灵敏，PCR结果判断清晰，专一性较好，切适用于猪的各类组织鉴定。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1示实施例2电泳后银染结果；泳道1～4分别是：4号泳道DNAmarker，1号泳道所用引物为P3和P4，2号泳道空白组，3号泳道引物为P1和P2；

图2示实施例5适用性检测结果；泳道1～6分别是：1号泳道空白对照，2号泳道模板为肌肉DNA，3号泳道模板为肝脏DNA，4号泳道模板为脾脏DNA，5号泳道模板为猪脑DNA；