[发明专利]一种牙鲆弹状病毒PCR检测试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201711031636.2 | 申请日： | 2017-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN107841574A | 公开（公告）日： | 2018-03-27 |
| 发明（设计）人： | 余炎炎;秦英惠;藏明丽;高进勇;李欢;鲁有强 | 申请（专利权）人： | 信阳学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 464000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 弹状病毒 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于检测牙鲆弹状病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于，包含特异性引物，所述特异性引物的序列如SEQ NO.1和SEQ NO.2所示。
2.根据权利要求1 所述的试剂盒，其特征还在于，每种引物的终浓度为0.5pmol/μL。
3.根据权利要求1 所述的试剂盒，其特征还在于，采用20μL的反应体系，包括：PCR-Mix 10μL；ddH2O 7μL；浓度10pmol/μL的上、下游引物各1μL；cDNA 1μL。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于，PCR扩增的反应条件为：预变性95℃，4min；再经95℃变性45s，57℃退火35s，72℃延伸1min，30个循环；最后72℃延伸10min。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于，牙鲆弹状病毒RNA反转录成cDNA的反应条件为：在20μL的反应体系中加入模板RNA 1μg；5×AMV Buffer 4μL；浓度2.5mmol/L的dNTP 4μL；浓度200U/μL的AMV 1μL；浓度25mmol/L的Oligo(dT)181μL，用DEPC水补至20μL；37℃水浴1h，95℃水浴5min灭活。
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