[发明专利]与心肌梗死相关的突变及其应用

说明书

本发明涉及与心肌梗死相关的突变及其应用，具体涉及是与凝血因子缺乏症合并急性下壁心肌梗死相关的突变及其应用。发明基于临床研究，收集凝血因子Ⅻ缺乏症合并急性下壁心肌梗死患者外周血进行高通量测序分析，通过查找患者基因突变，发现他们的凝血因子Ⅻ基因外显子存在1个突变G774A，该突变与FⅫ缺乏症合并急性下壁心肌梗死具有很好的相关性，为后续临床诊断与治疗奠定基础。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及与心肌梗死相关的突变及其在诊治疾病中的应用，尤其是与凝血因子缺乏症合并急性下壁心肌梗死相关的突变及其应用。

背景技术

心血管疾病日益成为人类死亡的主要因素，而在心血管疾病中，心肌梗死是患者住院率最高的疾病之一。心肌梗死是指心肌的缺血性坏死，为在冠状动脉病变的基础上，冠状动脉的血流急剧减少或中断，使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血，最终导致心肌的缺血性坏死。急性心肌梗死具有起病急，致死致残率高等特点，已成为威胁人类健康的重要原因。近年来，寻找具有高灵敏性和特异性的标记分子，用于及时诊断、预防以及控制急性心肌梗死发生发展，己成为急性心肌梗死治疗及预后评估的研究热点。

凝血因子是血浆与组织中直接参与凝血的物质的统称。其中已按国际命名法，用罗马数字按发现的次序编号的凝固因子有12种：凝血因子I，II，III，IV，V，VII，VIII，IX，X，XI，Ⅻ，ⅫI。此外，还有前激肽释放酶、激肽释放酶，以及来自血小板的磷脂等。凝血因子Ⅻ(FⅫ)又称接触因子、表面因子或HAGEMAN因子，其化学本质是糖蛋白，在肝脏中合成，主要功能为丝氨酸蛋白酶激活因子IX及PK。FⅫ缺陷症是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病，部分患者可表现为显性遗传，最早由Ratnoff于1955年报道，近年来有学者相继报道了FⅫ缺陷的FⅫ基因突变位点，临床上仅表现为活化部分凝血活酶时间(APTT)延长，而无明显的出血表现，多为术前、有创操作前或查体偶然发现，以凝血因Ⅻ活性和/或凝血因Ⅻ抗原水平降低为特征。现有研究认为凝血因子Ⅻ缺乏是预防血栓的保护性因素，认为凝血因子Ⅻ在止血过程中并不必需，但可促成病理性血栓，认为凝血因子Ⅻ缺乏是预防血栓的保护性因素，甚至提出在卒中及其他血栓栓塞疾病中可考虑将凝血因子Ⅻ作为治疗靶点；还有研究认为凝血因子Ⅻ缺乏与血栓无关。

本发明基于临床研究，收集凝血因子Ⅻ缺乏症合并急性下壁心肌梗死病例3例，通过高通量测序分析，通过查找患者基因突变，发现他们的凝血因子Ⅻ基因第8外显子存在1个stopgain突变G774A(p:W258X)，导致编码的第258位氨基酸由色氨酸变为stopgain，显示该突变具有致病性，为后续临床应用奠定基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离的突变体核苷酸，该突变体核苷酸的基因序列如SEQ ID NO：1所示。

上述分离的突变体核苷酸为凝血因子Ⅻ基因外显子上的突变G774A。

本发明的目的在于提供一种分离的突变体多肽，该突变体多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明的技术方案为：通过高通量测序分析，通过查找患者基因突变，发现他们的凝血因子Ⅻ基因外显子存在1个stopgain突变G774A(p:W258X)，导致编码的第258位氨基酸由色氨酸变为stopgain(终止子)，显示该突变具有致病性。基于此，可以采用检测该突变的方法，作为检测疾病的分子辅助判断依据。

一种检测生物样品是否存在凝血因子Ⅻ基因G774A突变的方法，包括以下步骤：

(1)利用凝血因子Ⅻ基因的第8外显子特异性引物对生物样品进行PCR扩增，针对所得扩增产物构建核苷酸测序文库，测序；

(2)检测生物样品中核苷酸是否存在G774A突变或氨基酸是否存在W258X突变。

一种心肌梗死检测试剂盒，所述试剂盒检测凝血因子Ⅻ基因G774A突变情况。含凝血因子Ⅻ基因G774A突变的生物样品具有较高的患病风险。