[发明专利]一种香豆素类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种香豆素类化合物及其制备方法和应用。本发明对独活药材的物质基础进行研究，得到了一种能得到新的香豆素类活性组分的提取分离方法，根据该方法提取的式I所示结构化合物对A7r5大鼠胸主动脉平滑肌细胞炎症模型的炎症因子NO有明显的抑制作用，显示出良好的体外抗炎作用。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种植物源化合物及其制备方法和应用。

背景技术

独活为伞形科(Umbelliferae)当归属(Angelica L.)植物重齿毛当归(Angelicapubescens Maxim.f.biserrata Shan et Yuan)的干燥根。主产于四川、湖北、安徽等地。性味辛、苦，微温。归肾、膀胱经。具有祛风除湿、通痹止痛之功效，主要用于治疗风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛等症。现代药理研究表明，独活有抗肿瘤、抗炎、镇痛、镇静、抑制血小板聚集和降压等多种活性。

迄今，从独活根及根茎分出的主要为香豆素类和挥发油成分，还有少量甾醇和糖类成分。其中，独活挥发油具有明显的抗炎和镇痛作用，香豆素类化合物是植物次生代谢产物，具有消炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抑制血小板聚集和血栓形成等生物活性，该类化合物在医药、农业等领域有广泛应用。以独活为主要原料的中成药种类多样，有独活止痛搽剂、独活寄生合剂、独活寄生丸、复方独活吲哚美辛胶囊等。同时，独活在保健领域的应用历史悠久，《神农本草经》上就有关于独活“久服，轻身、耐老”的记载，近年来已进入家畜保健领域。独活乙醇提取物对柑桔青霉、绿霉、炭疽、酸腐病菌的抑制活性也较好，在植保领域也出现应用，以独活为原料的植物源农药发展前景也十分广阔。鉴于独活多样的生物活性和广阔的市场前景，有必要对其化学成分进行进一步的研究，以探究其发挥药效的物质基础，为开发和利用独活资源提供参考依据。

现代医学研究表明，血管平滑肌是血管壁的重要组成部分，对于维持血管结构和功能起着很重要的作用。动脉粥样硬化、高血压等许多疾病的发生发展过程都与动脉平滑肌的异常增殖有关，其发展过程中有大量炎症因子参与。诱发炎症的因素有很多，如烧伤、化学刺激、物理损伤以及毒素等。其中，脂多糖(LPS)是细菌感染性炎症反应中最主要的促炎因子，可诱导炎症细胞合成并释放多种炎症因子，导致机体出现一系列病理生理反应。LPS诱导的血管平滑肌细胞异常增殖和功能紊乱在血管病变过程中起重要作用。

发明内容

本发明从中药独活中分离制备出一种具有抗炎活性的化合物，并提供了其在制备抗炎药物中的应用。

具体地，本发明提供了一种香豆素类化合物，具有式I结构：

本发明还提供了式I所示化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：将独活药材加乙醇提取，提取液浓缩得到浸膏；

步骤2：将浸膏加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯萃取部位浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；

步骤3：将乙酸乙酯浸膏进行柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的石油醚-乙酸乙酯体积比为50:1～1:1，收集石油醚-乙酸乙酯体积比为10:1～15:1的部位；

步骤4：将步骤3得到的部位进行凝胶柱色谱纯化，以甲醇或50％甲醇-水洗脱，收集洗脱液；

步骤5：将步骤4得到的洗脱液进行色谱分离纯化，以5％～30％的有机溶剂水溶液进行洗脱，该洗脱液处理后即得到式I所示化合物。

具体地，所述步骤1中所述乙醇体积分数为75％。

优选地，所述步骤1中所述独活药材与所述乙醇的重量比为1:(8～15)。

具体地，所述步骤4中，凝胶柱色谱中所用凝胶为Sephadex LH-20、Sephadex G15或Sephadex G50。