[发明专利]LMO3基因在制备胶质瘤抗肿瘤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及LMO3基因在制备胶质瘤抗肿瘤药物中的应用，具体为生物医药技术领域。

背景技术

星形胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发肿瘤，其中恶性度最高的是多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme，GBM，IV级)。由于GBM的增殖能力强、侵袭能力高及对放化疗的耐受，即使采取以手术切除为主，放、化疗为辅的综合治疗措施，患者平均生存期仍不足两年。近年来，越来越多的研究聚焦于以细胞关键基因和调控分子为靶点的“分子靶向治疗”，但是疗效依然无显著改善。因此，发现新的具有诊断或治疗意义的分子靶点，不但可为胶质瘤的分子诊断及分型奠定基础，而且有助于胶质瘤的靶向治疗。

LMO3属于仅有两个富含半胱氨酸的锌指样LIM结构域(LIM1和LIM2)的LMOs(LIM only protein，LMO)转录调节因子家族，该家族有4个结构高度保守、功能相似的成员组成(LMO1-LMO4)。LMOs家族其他三个成员(LMO1、LMO2、LMO4)在肿瘤发生中的关键作用已有大量文献报道，尤其LMO2、LMO4的异常表达促进白血病、乳腺癌发生发展的作用引起了各国学者广泛关注。近期文献报道癌基因LMO2在乳腺癌、结肠癌中通过WNT通路抑制肿瘤的生长(2013)，提示LMO2在肿瘤中具有相反的功能，LMOs家族其他成员是否具有相似的双重功能值得进一步的研究。已有文献报道LMO3可以显著促进细胞增殖，LMO3在神经母细胞瘤、肺癌、甲状腺癌、T细胞性白血病中表达上调，提示LMO3与肿瘤发生的密切关系。已有临床研究显示LMO3低表达的神经母细胞瘤患者的预后明显好于高表达患者，LMO3是神经母细胞瘤发生、发展及不良预后的预测分子。胶质瘤中LMO3因启动子低甲基化表达增加，检测LMO3甲基化水平可以作为胶质瘤预后预测的指标之一(CN.102329870A)。可见LMO3在肿瘤发生、发展等方面有重要作用，并且LMO3的组织表达与肿瘤的分级及预后密切相关，现有研究均显示LMO3具有癌基因的特性。但LMO3在胶质瘤中的表达改变对胶质瘤的作用及机制尚不清楚，其表达变化对胶质瘤常规化疗药物替莫唑胺的影响有待研究。但现有技术中尚未出现LMO3mRNA表达与胶质瘤的发生、发展及预后的关系研究，LMO3表达改变对胶质瘤生长、增殖的体内外研究尚不清楚。为了克服现有技术中存在的问题，本发明的目的在于公开研究LMO3在胶质瘤生长、增殖、化疗药物敏感性中的作用。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种降低肿瘤细胞增殖的方法，为提高肿瘤细胞中LMO3的表达水平，从而减低细胞的生长和增殖。更进一步提供了一个新的抑癌基因在胶质瘤预后预测、诊断，制备预防、治疗胶质瘤药物的应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：LMO3基因在制备诊断、预防和治疗胶质瘤的产品中的应用。

进一步的，所述的产品通过检测LMO3基因及其表达来诊断胶质瘤。

进一步的，所述的LMO3表达作为胶质瘤预后预测和预警诊断的新生物靶标。

进一步的，所述的胶质瘤诊断药物至少包括一对特异性扩增LMO3基因的引物和标准品，所述的引物由上游和下游引物组成，上游引物具有如5'-CTTTGTGTTGTGTAGCCCTAACGTC-3'(SEQ.ID.NO.5)的序列，下游引物具有如5'-ACTCAGCACTCTGTTGGAGTGGA-3'(SEQ.ID.NO.6)的核苷酸序列。

进一步的，所述的标准品是包含有LMO3序列的重组质粒pGEM-T-LMO3，所述标准品具有如SEQ.ID.NO.7所述的序列。

进一步的，所述的LMO3为基础的胶质瘤诊断方法是采用荧光定量RT-PCR法，以GAPDH为对照。

进一步的，所述的LMO3基因作为胶质瘤治疗药物敏感性的生物指标，至少但不限于替莫唑胺等化疗药物。

进一步的，所述的治疗或预防胶质瘤的表达载体和慢病毒，它是由LMO3和pLL3.7-CMV-IRES-puro载体构建而成。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：提供了一种新抑癌基因及该基因在制备胶质瘤诊断、预防或治疗药物中的应用，以LMO3为基础的诊断药物可方便快捷的在基因水平上实现肿瘤的检测，通过LMO3表达水平的检测预测患者的化疗效果和预后，以LMO3为靶点的药物有望成为胶质瘤靶向治疗的一种新手段。

附图说明