[发明专利]三种重组糖化酶及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710903102.8 | 申请日： | 2017-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN107475219B | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 黎明;袁颢瑜;路福平 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/34 | 分类号： | C12N9/34;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 糖化酶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.重组糖化酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2或SEQ IDNO：3所示。
2.权利要求1所述重组糖化酶的用途，其特征在于，用于催化可溶性淀粉生产葡萄糖。
3.如权利要求2所述重组糖化酶的用途，其特征在于，所述重组糖化酶的酶活为22041.3U/mL或17962.9U/mL或20163.8U/mL，和/或所述重组糖化酶在60℃放置4h残余酶活为60%或46%或61%，和/或所述重组糖化酶在pH4.0放置6h残余酶活为74%或70%或82%。
4.包含权利要求1所述重组糖化酶基因的表达载体。
5.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体为pJ912-19。
6.包含权利要求1所述重组糖化酶基因的宿主细胞。
7.如权利要求6所述宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为毕赤酵母X-33。
8.权利要求1所述重组糖化酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：12所示的重组糖化酶基因经过酶切、纯化，连接到pJ912-19载体，得到重组表达载体；
（2）所述的重组表达载体转化至毕赤酵母X-33，得到重组菌株；
（3）表达所述的重组菌株，纯化获得重组糖化酶。
9.如权利要求8所述的重组糖化酶的制备方法，其特征在于，所述重组糖化酶的酶活为22041.3U/mL或17962.9U/mL或20163.8U/mL，和/或所述重组糖化酶在60℃放置4h残余酶活为60%或46%或61%，和/或所述重组糖化酶在pH4.0放置6h残余酶活为74%或70%或82%。
10.权利要求1所述重组糖化酶的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列：
（a）：如SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：12所示；
或（b）：与（a）的核苷酸序列互补。
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