[发明专利]与谷子颖壳颜色性状紧密连锁的分子标记、引物及应用有效
申请号: | 201710863719.1 | 申请日: | 2017-09-22 |
公开(公告)号: | CN107385105B | 公开(公告)日: | 2021-03-19 |
发明(设计)人: | 王军;王智兰;邹洪锋;杜国华;杜晓芬;杨慧卿;郭二虎;袁国保;韩芳;袁峰;张林义;彭书忠 | 申请(专利权)人: | 山西省农业科学院谷子研究所;深圳华大小米产业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 李振瑞 |
地址: | 046011 山西*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 谷子 颜色 性状 紧密 连锁 分子 标记 引物 应用 | ||
1.一种与谷子颖壳颜色性状紧密连锁的分子标记,其特征在于,所述分子标记为MRI325,MRI325的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1或者SEQ ID NO. 2所示,位于谷子第7条染色体17265937bp至17288536bp区间内。
2.一种获得权利要求1所述的与谷子颖壳颜色性状紧密连锁的分子标记的引物,其特征在于,所述引物为MRI325F和MRI325R,其中引物序列如下:
MRI325F:5’- ACCCTGGTAAACTCATGCCT-3’,
MRI325R:5’- TGGGTTTGGAGCATCAGGAT-3’。
3.一种应用权利要求2所述的引物鉴定谷子颖壳颜色的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,提取待检测谷子材料的基因组DNA,谷子材料品种为晋谷21或者矮宁黄;
S2,PCR扩增:
a. 反应体系:10µL体系,各组分物质的含量分别为:1µL基因组DNA、0.5µL上游引物、0.5µL下游引物、1µL10×Buffer、0.8µLdNTPs、0.1µLTaq酶、ddH2O 6.1µL,混匀;
其中,上游引物为权利要求2所述MRI325F、下游引物为权利要求2所述MRI325R;
b. PCR反应程序:
94℃预变性5min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸40s,运行35个循环;最后72℃延伸10min;
S3,电泳:
扩增后的产物进行8%聚丙烯酰胺凝胶电泳,120V电压,电泳1.5h;
S4,结果判定:
如果扩增后的产物片段大小为151bp,则待测谷子材料的谷子颖壳颜色为黄色,如果扩增后的产物片段大小为189bp,则待测谷子材料的谷子颖壳颜色为白色。
4.一种权利要求2所述的与谷子颖壳颜色性状紧密连锁的分子标记的引物在谷子颖壳颜色早期鉴定中的应用,其特征在于,所述谷子品种为晋谷21或者矮宁黄。
5.一种权利要求3所述的鉴定谷子颖壳颜色的方法在谷子颖壳颜色早期鉴定中的应用,其特征在于,所述谷子品种为晋谷21或者矮宁黄。
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