[发明专利]一种郫县豆瓣黄曲霉毒素B1检测的前处理方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品质量安全检测技术领域，尤其涉及一种郫县豆瓣黄曲霉毒素B1检测的前处理方法。

背景技术

郫县豆瓣属中国传统发酵食品，迄今为止已有300多年的历史，被列为中国非物质文化遗产。郫县豆瓣不仅生产工艺独特，也以其味辣香醇、粘稠绒实、红棕油亮、酱香浓郁等特点在我国酱类产品中独树一帜，堪称川菜之魂。据权威统计，2015年“郫县豆瓣”品牌价值已达607.16亿元，位列“加工食品类地理标志产品”全国第一；当年产品总产量达到110万吨，实现工业产值102亿元，出口世界绝大部分国家和地区，创汇超过4000万美元。

随着“川菜、川味、川菜调味品”走出四川走向全国，我国已成为全球最大的辣椒生产、消费和出口国，中国辣椒产业的发展对全球辣椒产业发展具有重要的影响。据第三次全国经济普查统计，国内50万家规模以上餐饮企业当中，就有10万家是以川菜为主打菜品，更有超过100万家的小型川菜餐馆几乎分布于世界的各个角落，川菜之魂-郫县豆瓣作为川菜调味品代表也得到了广泛传播和使用。与此同时，据统计四川居民总食物消费中，调味品日均消费量占到了94.13g，其中豆瓣酱消费量占到了10.25g，远高于全国其它地区。

郫县豆瓣的生产包括前期发酵和后熟发酵两个阶段，前期发酵主要是指霉瓣子的制曲和辣椒坯的预处理。后熟发酵主要是将成熟霉瓣子和成熟辣椒坯按比例配料混合，加入适量食盐和水，进入发酵池发酵，经过一定时期的翻晒和陈化，即是郫县豆瓣特有的日晒夜露工艺。但是，相当一部分生产企业不重视霉瓣子的制曲、后发酵期的管理和环境卫生，常出现黄曲霉毒素B1超过国家标准限量的问题，带来食品质量安全隐患。

黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是目前发现毒性和致癌性最强的化学物质之一，于1993年被世界卫生组织(WHO)癌症研究机构划定为一类致癌物。黄曲霉毒素主要是由黄曲霉(Aspergillusflavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)等产生的一类含有二氢呋喃环结构的次生代谢产物，常见的有B1、B2、G1、G2、M1五种，其中又以B1具有强烈致癌、致畸和致突变作用为甚。

黄曲霉毒素的LD50(半数动物致死量)为0.249mg/kg，毒性相当于氰化钾的10倍，砒霜的68倍；黄曲霉毒素中毒主要是含超标毒素的食物经摄入后被消化道吸收，在体内进行羟基化、去甲基化和环氧化等代谢过程，主要代谢产物大部分分布在肝脏，在肾脏、血液、肌肉和脂肪中也有少量分布，具有毒性或致癌、致突变作用。

黄曲霉毒素B1的检测前提，是其高效特异性的提取。目前，国内专家关于食品当中黄曲霉毒素B1的检测做了大量卓有成效的工作，主要集中在利用高效液相色谱、酶联免疫吸附、亲和层析等技术实现对食用植物油、米面、酱油、花生、食源性动物组织等当中的黄曲霉毒素B1的快速检测。但是，对于郫县豆瓣当中黄曲霉毒素B1检测的前处理技术还很少报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有郫县豆瓣黄曲霉毒素B1检测前处理针对性不强的问题，通过郫县豆瓣的采样、预处理、黄曲霉毒素B1的提取，实现快速高通量的郫县豆瓣黄曲霉毒素B1的精确测定。

一种郫县豆瓣黄曲霉毒素B1检测的前处理方法，包括以下步骤：

步骤1：利用萃取分离的方法提取郫县豆瓣中溶解的黄曲霉毒素B1溶液；

步骤2：提取步骤1中下层沉淀的黄曲霉毒素B1溶液；

步骤3：将步骤1与步骤2提取的黄曲霉毒素B1溶液合并；

步骤4：检测步骤3合并溶液中黄曲霉毒素B1含量。

进一步地，如上所述的方法，所述步骤1包括：利用甲醇溶解郫县豆瓣中的黄曲霉毒素B1，利用正己烷溶解去除郫县豆瓣中的脂肪，利用三氯甲烷溶解去郫县豆瓣中的除蛋白质。

进一步地，如上所述的方法，所述步骤1包括：

1)将郫县豆瓣捣碎，随后加入甲醇溶液，再加入正己烷，然后在实验摇床中以250r/min的速度震荡5-10分钟；

2)取一定量的步骤1)振荡后的溶液进行离心；

3)离心后，取中间层加入三氯甲烷，在实验摇床中以250r/min的速度震荡5-10分钟；取下层三氯甲烷溶液，然后加入甲醇溶液复溶，最后加蒸馏水稀释待用