[发明专利]一种鉴别葫芦尖孢镰刀菌的方法有效
| 申请号： | 201710853886.8 | 申请日： | 2017-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN107447036B | 公开（公告）日： | 2021-02-26 |
| 发明（设计）人： | 张曼;羊杏平;徐锦华;刘广;姚协丰;任润生 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;徐冬涛 |
| 地址： | 210014*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 葫芦 镰刀 方法 | ||
【权利要求书】：
1.ISSR标记引物UBC886在鉴别葫芦尖孢镰刀菌中的应用，所述ISSR标记引物UBC886的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.ISSR标记引物UBC886在制备鉴别葫芦尖孢镰刀菌的试剂中的应用，所述ISSR标记引物UBC886的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种用于鉴别葫芦尖孢镰刀菌的方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）提取葫芦尖孢镰刀菌菌株基因组DNA；
（2）利用权利要求1中所述的ISSR标记引物UBC886对葫芦尖孢镰刀菌菌株基因组DNA进行PCR扩增；
（3）扩增产物进行凝胶电泳，能扩增出1800bp的特异性条带的为葫芦尖孢镰刀菌。
4.根据权利要求3所述的鉴别葫芦尖孢镰刀菌的方法，其特征在于：在步骤（2）中，所述PCR扩增的反应体系为：模板DNA 0.5-100 ng、引物UBC8861.5 μL、2xTaq PCRMaster Mix12.5μL、Tag 0.5μL、无菌水补足25μL；PCR反应程序为：94℃预变性5min，然后94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸1.0 min，共35个循环，最后72℃总延伸7 min，4℃保存。
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