[发明专利]一种分泌抗赭曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用有效
申请号: | 201710844559.6 | 申请日: | 2017-09-19 |
公开(公告)号: | CN107513522B | 公开(公告)日: | 2020-04-28 |
发明(设计)人: | 何方洋;洪小栩;万宇平;崔廷婷;袁媛;曹东山;南铁贵;赵正苗 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/14;G01N33/577 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分泌 曲霉 毒素 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
1.一种分泌抗赭曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为赭曲霉毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株F-3-3,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.14303,保藏日期为2017年06月15日,其特征在于:所述杂交瘤细胞株是通过OTA半抗原与牛血清白蛋白偶联得到免疫抗原后免疫小鼠制备并筛选得到的;所述OTA半抗原的合成方法为:取8-羟基-3-甲基-1-氧代苯并吡喃-7-羧酸0.5g,加20mL二氯甲烷溶解,取草酰氯0.31g,加0.5mL N,N-二甲基甲酰胺溶解稀释,滴加到二氯甲烷溶液中,室温搅拌2h,加入4-硝基苯丙氨酸0.52g,加三乙胺0.3mL,室温搅拌2h,停止反应,加水20mL,震荡静置,分出水相,有机相浓缩蒸干,上硅胶柱,体积比为1/5的乙酸乙酯/石油醚洗脱分离,得到硝基赭曲霉素0.87g;取硝基赭曲霉素0.87g,加乙醇50mL溶解,加钯碳0.2g,通入氢气,室温搅拌4h,停止反应,过滤,除去钯碳,旋蒸除去乙醇,得到红色油状物,30mL体积比为1/1的二氯甲烷/石油醚重结晶,得到氨基赭曲霉素0.76g,即为OTA半抗原。
2.一种抗赭曲霉毒素单克隆抗体,其特征在于:它是由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.14303的赭曲霉毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株F-3-3分泌产生的。
3.权利要求2所述抗赭曲霉毒素单克隆抗体的应用,其特征在于:用于中药中赭曲霉毒素A的分析检测。
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