[发明专利]HLA-B等位基因在制备预测植物何首乌及其成分致肝损伤风险的检测试剂中的应用

说明书

本发明公开了HLA‑B*35:01等位基因的用途。1、作为遗传标记物和治疗靶点用于制备预测植物何首乌及何首乌成分致肝损伤风险的检测试剂。2、作为治疗靶点用于制备治疗何首乌致肝损伤的药物。3、作为标志物用于制备筛查因何首乌及含何首乌物质导致肝损伤的高敏人群的检测试剂。

技术领域

本发明涉及HLA-B*35:01等位基因的用途，特别涉及HLA-B*35:01等位基因作为植物何首乌、含何首乌成分的药物制剂、含何首乌成分保健品致肝损伤风险遗传标记的应用。

背景技术

在我国，中草药引起的肝损伤占全部药物性肝损伤的21％，其中何首乌引起的肝损伤最为引人注目。廖科植物何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)在我国已沿用千年，被视为“四大仙草”之一。植物何首乌的用途广泛，干燥块根被称作“何首乌(POLYGONIMULTIFLORI RADIX)”或“首乌”；炮制加工品被称为“制何首乌(POLYGONI MULTIFLORIRADIX PRAEPARATA)”；干燥藤茎被称为“首乌藤(POLYGONI MULTIFLORI CAULIS)”。我国食用何首乌的人群基数巨大，近年来口服何首乌及其成方制剂有造成肝损伤的案例逐年增多。但是由于何首乌成分复杂，用法多样，现有的研究尚未能明确其毒性成分和致病机制，故仍无可用于针对何首乌肝损伤有效的预测、诊断和治疗手段。

既往的流行病学研究显示，何首乌致肝损伤发生率低，多发生于服药后l～4周，与患者性别、年龄不相关，低剂量服用也可发生，还存在再激发现象和家族性案例报道。既往何首乌在正常动物模型中需要大剂量、长期给药情况下才能引起肝损伤，与临床肝毒性病例相差甚远，而在基于内毒素(脂多糖)免疫敏化的特异质肝损伤动物模型中，何首乌在较低剂量即可引起动物肝功能损伤和组织病理学改变，与临床案例相似。因此可推测何首乌致肝损伤是免疫性特异质肝损伤。

人类白细胞抗原(human leukocyte antigen，简称HLA)是一组紧密连锁的基因组，通过编码和产生与免疫应答及免疫识别有关的蛋白分子识别和递呈抗原肽，启动适应性免疫应答。越来越多的人类全基因组关联研究已经证实，HLA基因型与部分药物特异性肝损伤也存在强关联性。例如：HLA-A*02:01、HLA-DQB1*06:02等位基因在欧美白种人中与阿莫西林克拉维酸钾致肝损伤存在强烈相关性(OR＝2.3(1.8-2.9)，p＝1.8×10^-10；OR＝4.2(2.7-6.6)，p＝4.6×10^-10)；HLA-DRB1*07:01等位基因与肿瘤靶向药物拉帕替尼致肝损伤存在较强相关性(p＝7.8×10^-11)；HLA-B*57:01等位基因与氟氯西林致肝损伤存在强相关(OR＝80.6，p＝9.0×10^-19)等。现有研究证实，小分子药物可与特异性HLA分子非共价结合形成复合物，共同将抗原递呈至细胞膜表面供T细胞受体识别，激活T细胞，对肝细胞产生杀伤作用。因此，不同类型的HLA基因型可作为预测不同药物引起免疫性特异质肝损伤的遗传标记物。FDA要求卡马西平、阿巴卡韦、拉帕替尼、别嘌呤醇等药品说明书注明其特异性药物不良反应与HLA基因型的关联性，并建议服药前检查相关HLA基因型，用于预测药物不良反应的发生。

HLA-B属于I型白细胞抗原，具有较为复杂的多态性，已有656种不同等位基因被检出，其编码蛋白几乎在所有有核细胞中均有表达，主要功能是递呈外源性抗原到细胞表面，供CD8+T细胞识别。现有证实，HLA-B不同等位基因与部分药物性肝损伤存在强关联性，如HLA-B*57:01与氟氯西林致肝损伤，B*44:03与噻氯匹定致肝损伤，B*35:02与米诺环素致肝损伤等。

发明内容