[发明专利]一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统及其制备方法

权利要求书

1.一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统，其特征在于，包括2-氨基葡萄糖-荧光染料FITC和紫杉醇，其中2-氨基葡萄糖-荧光染料FITC作为小分子的亲水端，紫杉醇为小分子疏水端；所述的2-氨基葡萄糖-荧光染料FITC作为“导向基团”靶向高表达葡萄糖转运受体GLUT1的肿瘤细胞和组织，并将其作为形成纳米粒子的亲水端，共价偶联作为纳米粒子疏水端的紫杉醇合成同时具有亲水性和疏水性的2-氨基葡萄糖荧光染料-紫杉醇(2DA-FITC-PTX)两性小分子单体，进一步用纳米沉淀法制备靶向性2-氨基葡萄糖荧光染料-紫杉醇纳米粒子载药系统(2DA-FITC-PTXNP)。

2.如权利要求1所述的一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.1 谷氨酸-紫杉醇(Fmoc-Glu(OtBu)-PTX)的合成；

2.2 2-氨基葡萄糖-谷氨酸-紫杉醇(2DA-NH₂-Glu-PTX)前药的制备；

2.3 2-氨基葡萄糖-荧光染料-紫杉醇(2DA-FITC-PTX)前药小分子单体的制备；

2.4 2-氨基葡萄糖-荧光染料-紫杉醇前药靶向性纳米粒子载药系统(2DA-FITC-PTXNP)的制备。

3.根据权利要求2所述的一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统的制备方法，其特征在于，步骤2.1中将称取100mgPTX溶于15ml的二氯甲烷(DCM)，同时加入59.7mgFmoc-Glu(OtBu)-OH和14.29mg4-二甲氨基吡啶DMAP，将44.85mg1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)溶于10mlDCM中，在冰浴条件下，将10ml溶于EDC溶液缓慢滴入PTX反应体系中，20-30分钟滴加完毕，除去冰浴，室温下搅拌20-30个小时，用TLC示踪，待反应完后用同体积的DCM 稀释，然后用同体积的蒸馏水洗2次，加入无水硫酸镁干燥，真空旋蒸后得晶状体产物谷氨酸-紫杉醇(Fmoc-Glu(OtBu)-PTX)。

4.根据权利要求2所述的一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统的制备方法，其特征在于，步骤2.2中将上述产物谷氨酸-紫杉醇(Fmoc-Glu(OtBu)-PTX)溶于8mlDCM，在室温搅拌过夜，直至出现浑浊并TLC示踪，将产物再次真空旋蒸除去溶剂，再用乙醚萃取放入冰箱过夜，将乙醚去除，烘干产物，即得脱去了OtBu的Fmoc-Glu(COOH)-PTX白色晶体，将0.01mmolFmoc-Glu(COOH)-PTX溶于DMF中，加入EDC和NHS活化Fmoc-Glu(COOH)-PTX的羧基，室温搅拌4-6小时，加入0.01mmol摩尔2DA，室温搅拌过夜，将反应液经硅胶柱纯化，得到纯化的2-氨基-谷氨酸-紫杉醇(2DA-Fmoc-Glu-PTX)，将2DA-Fmoc-Glu-PTX溶于在DCM体系中加入2ml哌啶，用乙醚萃取，用TLC示踪，得到2DA-NH₂-Glu-PTX前药。

5.根据权利要求2所述的一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统的制备方法，其特征在于，步骤2.3中将0.1mmol2DA-NH₂-Glu-PTX前药中加入DCM溶解后，加入0.1mmol荧光染料FITC，室温搅拌过夜，将反应液经G15聚糖凝胶层析柱分离纯化，去除没有共价偶联的2DA-NH₂-Glu-PTX和FITC片段，得到纯化的2氨基葡萄糖-荧光染料紫杉醇前药(2DA-NH₂-Glu-PTX-FITC)小分子单体，-20℃储存备用。

6.根据权利要求2所述的一种两性小分子自组装靶向性纳米粒子载药系统的制备方法，其特征在于，步骤2.4中用纳米沉淀法制备，将0.1mmol2DA-NH₂-Glu-PTX-FITC的小分子单体溶于THF在室温下由有机相转入水相，并除去有机相四氢呋喃THF,用2500-3500转离心2-6min后除去沉淀，得到分布均一靶向性纳米载药系统。