[发明专利]一种盐酸多西环素杂质C的制备方法

说明书

本发明公开了一种盐酸多西环素杂质C的制备方法，包括如下步骤：步骤S1，高温处理：先称取盐酸多西环素原料，加四氢呋喃水溶液溶解制成盐酸多西环素溶液，所述四氢呋喃水溶液中四氢呋喃的体积百分含量为15‑35％，然后沸水浴处理2‑3小时，冷却后浓缩去除溶液中的四氢呋喃，最后冷冻干燥得高温处理样品；步骤S2，高速逆流色谱分离：用等体积固定相和流动相将上述高温处理样品溶解作为样品溶液，以乙酸乙酯‑乙醇‑水‑冰醋酸(5:2:6:0.04，v/v/v/v)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在主机转速800r/min、流速2.0mL/min、检测波长268nm条件下，根据色谱图收集杂质C对应的流分。本发明提供的方法制备效率高，杂质C纯度高。

技术领域

本发明属于药物领域，涉及杂质对照品的制备方法，具体涉及一种盐酸多西环素杂质C的制备方法。

背景技术

文献公开了一种盐酸多西环素杂质C的制备(盐酸多西环素杂质C的制备及体外抗菌活性与毒性研究，中国药科大学学报，2016)，但是该方法杂质C得率低(约10％)，而且其使用的是制备液相，制备液相上样量小，需多次反复分离，效率低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种盐酸多西环素杂质C的制备方法，以提高杂质C的制备效率。

本发明通过下面的技术方案得以实现：

一种盐酸多西环素杂质C的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1，高温处理：

先称取盐酸多西环素原料，加四氢呋喃水溶液溶解制成盐酸多西环素溶液，所述四氢呋喃水溶液中四氢呋喃的体积百分含量为15-35％，然后沸水浴处理2-3小时，冷却后浓缩去除溶液中的四氢呋喃，最后冷冻干燥得高温处理样品；

步骤S2，高速逆流色谱分离：

用等体积固定相和流动相将上述高温处理样品溶解作为样品溶液，以乙酸乙酯-乙醇-水-冰醋酸(5:2:6:0.04，v/v/v/v)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，在主机转速800r/min、流速2.0mL/min、检测波长268nm条件下，根据色谱图收集杂质C对应的流分。

优选地，盐酸多西环素溶液浓度为8-12mg/mL。

优选地，高速逆流色谱采用多层聚四氟乙烯螺旋管作为分离管，直径2.3mm，分离体积230mL，β值为0.5-0.8。

优选地，样品溶液进样量为10mL。

优选地，分离柱温为35℃。

优选地，四氢呋喃水溶液中四氢呋喃的体积百分含量优选25％。

优选地，将乙酸乙酯、乙醇、水、冰醋酸四种试剂按照体积比例混合，剧烈振摇后静置12小时分离上相和下相。

本发明的优点：

1、本发明方法中，盐酸多西环素溶液中含有四氢呋喃有助于杂质C的生成；

2、本发明方法中，高速逆流色谱比制备液相色谱上样量高，单次制备的杂质C量大，且所获得的杂质C纯度高，在95％以上。

附图说明

图1为实施例1高温处理样品的高速逆流色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步介绍本发明的技术方案。

下述实施例采用的高速逆流色谱仪的相关信息：