[发明专利]一种基于量子点的蛋白质印迹聚合物微球及其制备和应用

权利要求书

1.一种基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球，其特征在于：聚合物微球以巯基乙酸（TGA）和谷胱甘肽（GSH）共同作为稳定剂的CdTe量子点直接作为功能单体，蛋白质为模板分子，多巴胺为交联剂，通过多巴胺的自聚合得聚合物微球。

2.按权利要求1所述的基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球，其特征在于：所述蛋白质为藻蓝蛋白（PC）或牛血红蛋白（BHb）。

3.按权利要求1或2所述的基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球，其特征在于：所述巯基乙酸和谷胱甘肽共同稳定的CdTe量子点的制备方法：

1）碲粉和硼氢化钠混合后加入乙醇和水的混合液，而后在30-50 ℃水浴中加热反应至黑色的碲粉完全消失，上清液变为淡紫色为止；

2）硝酸镉加入至过量的水中，然后加入巯基乙酸和谷胱甘肽，而后调节体系pH至8-10，调节后加入步骤1）获得碲粉产物的上清液，氮气保护下回流，得到绿色巯基乙酸和谷胱甘肽共同稳定的CdTe量子点液。

4.一种权利要求1所述的基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于：以巯基乙酸（TGA）和谷胱甘肽（GSH）共同作为稳定剂的CdTe量子点直接作为功能单体，蛋白质为模板分子，多巴胺为交联剂，通过多巴胺的自聚合得到的蛋白质印迹聚合物微球即为荧光纳米印迹传感器；

具体为

a. 巯基乙酸和谷胱甘肽（TGA-GSH）共同稳定的CdTe量子点的制备：

1）碲粉和硼氢化钠混合后加入乙醇和水的混合液，而后在水浴中30-50 ℃恒温反应至黑色的碲粉完全消失，上清液变为淡紫色为止；

2）硝酸镉加入至过量的水中，然后加入巯基乙酸和谷胱甘肽，而后调节体系pH至8-10，调节后加入步骤1）获得碲粉产物的上清液，氮气保护下回流，得到绿色巯基乙酸和谷胱甘肽共同稳定的CdTe量子点液；待用；

b. 蛋白质纳米印迹聚合物的制备：取上述TGA-GSH共同稳定的量子点溶液，加入到含有蛋白质的磷酸缓冲（PBS）溶液中，搅拌后加入多巴胺，加入过硫酸钾（KPS），水浴中反应过夜；将所得的聚合物用洗脱液乙醇/乙腈洗涤，以去除模板蛋白质，即为蛋白质印迹聚合物。

5.按权利要求4所述的基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于：所述步骤a. 巯基乙酸和谷胱甘肽共同稳定的CdTe量子点的制备：1）称取25-45 mg碲粉和30-50 mg的硼氢化钠，加入0.5-2.5 mL的乙醇和0.1-1.5 mL的水，在30-50 ℃的水浴中加热反应至黑色的碲粉完全消失，上清液变为淡紫色为止；

2）称取80-100 mg的硝酸镉加入到65-85 mL水，然后加入15-35 μL的巯基乙酸和100-120 mg谷胱甘肽，用0.5-1.5 M的氢氧化钠溶液调节溶液的pH，用氮气吹20-40 min，然后取步骤1）制备的淡紫色上清液0.5-2 mL加入到硝酸镉溶液中，氮气保护下，回流1-3小时，得到绿色巯基乙酸和谷胱甘肽共同稳定的CdTe量子点液。

6.按权利要求4所述的基于荧光量子点的蛋白质印迹聚合物微球的制备方法，其特征在于：所述步骤b. 蛋白质荧光纳米印迹聚合物的制备：

a) 取4-6 mL TGA-GSH共同稳定的量子点溶液，加入到含有20-40 mg藻蓝蛋白的5-20mL pH=6.5-8.5, 5-20 mM PBS溶液中，搅拌2-6小时后，加入20-40 mg多巴胺，氮吹10-30min后，加入3-7 mg KPS，30-50 ℃水溶中反应过夜，将所得的聚合物用洗脱液乙醇/乙腈为v/v =8:2,洗涤2-5次，以去除模板藻蓝蛋白，将制得藻蓝蛋白印迹聚合物；

b) 取4-6 mL TGA-GSH共同稳定的量子点溶液，加入到含有5-20 mg牛血红蛋白的5-20mL pH=6.5-8.5, 5-20 mM PBS溶液中，搅拌2-6小时后，加入5-20 mg多巴胺，氮吹10-30min后，加入3-7 mg KPS，30-50 ℃水溶液中反应过夜，将所得的聚合物用洗脱液乙醇/乙腈为v/v =8:2,洗涤2-5次，以去除模板牛血红蛋白，将制得牛血红蛋白印迹聚合物。