[发明专利]一种细菌营养培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及兽医微生物领域，尤其涉及一种细菌营养培养基及其制备方 法。

背景技术

目前，畜牧业养殖场中病原菌会导致牲畜患病，并且难以通过临床症状 对病原菌导致的疾病进行准确的诊断，导致用药不准以及药物滥用。例如， 对于兔场而言，巴氏杆菌、波氏杆菌和魏氏梭菌等为獭兔发病的主要病原菌， 但是难以通过临床症状对上述病原菌导致的疾病进行准确的诊断，导致用药 不对症，或者用药对症但是用量过多过少造成致病菌对一些常用抗生素产生 耐药性，导致用药对症却没有明显效果。为了能够有效快捷的治疗病原菌， 一般的方式是：通过提供一种能够对一般细菌均可进行培养的全营养培养 基，进行细菌的培养，然后通过药敏实验对培养基中的细菌进行药物敏感度 测定，通过细菌对药物敏感度的高低以决定使用哪种药物以及使用多少含 量，从而准确有效的对病原菌导致的疾病进行治疗。

目前被相关技术人员广泛接受的可用于对一般细菌均能够进行培养且 用来进行快速药敏实验的全营养培养基为三种：(1)高氏一号培养基、(2) 营养琼脂培养基、(3)加血清血红素的普通兔鲜血培养基。但是这三种培 养基均存在一定的问题，例如高氏一号培养基属于合成培养基，这种培养基 的各种成分是已知的各种化学物质，微生物在这类培养基中生长较慢。

另外，培养基的质量受培养基制备过程的影响。目前，培养基制备过程 中通常会存在以下问题：培养基制备过程不科学，导致制得的培养基对于细 菌的培养效果不好。

因此，提供一种能够对一般细菌均可进行培养的全营养培养基，并且可 利用此培养基进行药敏实验，从而准确有效的利用药物对病原菌导致的疾病 进行治疗以及提供一种能够制备这种全营养培养基的制备方法，使制得的培 养基对于一般细菌具有良好的培养效果具有重要意义。

发明内容

本发明旨在解决上面描述的问题。本发明的目的是提供一种针对一般细 菌均可培养的全营养培养基及其制备方法。

根据本发明的一个方面，提供一种用于制备细菌营养培养基的方法，所 述细菌为导致兔发病的病原菌，所述制备方法包括下述步骤：

步骤1，制备兔肝粉；

步骤2，取0.6～1.0L的水加入烧杯中，量取兔肝粉25～35g，NaCl 3～7g， 柠檬酸钠1～3g，葡萄糖5～15g，乳糖5～15g，甘露醇5～15g溶解于水中并 搅拌均匀，得到混合均匀的混合液，然后量取琼脂15～25g加入混合液中， 在90℃～98℃下对混合液加热至琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌 混合液；

步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.1～0.3L，然后 加入pH调节剂，将混合液的pH值调节至6.8～7.5；

步骤4，将步骤3所得调节PH值之后的混合溶液在120℃～122℃， 101～102KPa的条件下高温灭菌18～22分钟，得到高温灭菌后的混合溶液；

步骤5，将步骤4中高温灭菌后的混合溶液冷却至44℃～55℃，加入兔 鲜血75～85ml搅拌均匀得到所述细菌营养培养基。

具体地，所述制备兔肝粉的步骤还包括：

步骤11，取生兔肝脏140～160g，加水150～200ml煮沸8～12分钟，去水 研磨成肉糊；

步骤12，在步骤11所得肉糊中添加蛋白酶搅拌均匀，将搅拌均匀的肉 糊置于55～65℃下保温11～13小时得到保温后的肉糊，对保温后的肉糊加水 300～500ml进行水煮煮沸12～17分钟使保温后的肉糊中的蛋白酶失活，并形 成兔肝脏浆液；

步骤13，将步骤12中获得的兔肝脏浆液在离心机中以2800～3200转/分 钟的转速离心处理4～6分钟，过滤掉残渣和油，得到过滤后的兔肝脏浆液， 将所述过滤后的兔肝脏浆液干燥形成兔肝粉。

其中，蛋白酶用量为0.29～0.31万U/g。

具体地，所述制备方法包括下述步骤：

步骤1，制备兔肝粉；

步骤2，取0.8L的水加入烧杯中，量取兔肝粉30g，NaCl 5g，柠檬酸钠 2g，葡萄糖10g，乳糖10g，甘露醇10g溶解于水中并搅拌均匀，得到混合 均匀的混合液，然后量取琼脂20g加入混合液中，在95℃下对混合液加热至 琼脂完全融化，并在此加热过程中不断搅拌混合液；

步骤3，在步骤2中所得的加入琼脂的混合液中补加水0.2L，然后加入 pH调节剂，将混合液的pH值调节至7.2；