[发明专利]一种芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法

说明书

一种芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法，所述芪胶升白胶囊由大枣、阿胶、血人参、淫羊藿、苦参、黄芪和当归按照下述方法制备而成：以上七味，除阿胶外，当归粉碎成细粉；其余大枣等五味，加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液加入烊化后的阿胶，搅匀，浓缩至75‑85℃下相对密度为1.30的稠膏，加入上述当归细粉，混匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，即得；所述DNA条形码鉴定方法包括对大枣、淫羊藿和当归的鉴定方法。本发明可对芪胶升白胶囊中的原料药材大枣、淫羊藿和当归进行鉴定，能更好地控制该产品的治疗，确保其临床疗效。

技术领域

本发明涉及一种芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法，属于药品技术的领域。

背景技术

芪胶升白胶囊是一种苗医中医互补的民族药，内含棕褐色的颗粒及粉末，味苦，主要由大枣、阿胶、血人参、淫羊藿、苦参、黄芪、当归等组成，具有补血益气的功效，临床上用于治疗气血亏损所引起的头昏眼花、气短乏力、自汗盗汗，以及白细胞减少症等。现有技术中，各药材属内药材物种不易区分，影响了临床用药的有效性和安全性。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法。本发明可对芪胶升白胶囊中的原料药材大枣、淫羊藿和当归进行鉴定，能更好地控制该产品的治疗，确保其临床疗效。

本发明采用如下技术方案实现：一种芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法，所述芪胶升白胶囊由大枣240-260份、阿胶240-250份、血人参365-385份、淫羊藿365-385份、苦参240-260份、黄芪740-760份和当归240-260份按照下述方法制备而成：以上七味，除阿胶外，当归粉碎成细粉；其余大枣等五味，加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液加入烊化后的阿胶，搅匀，浓缩至75-85℃下相对密度为1.30的稠膏，加入上述当归细粉，混匀，制成颗粒，干燥，装入胶囊，即得；所述DNA条形码鉴定方法包括对大枣、淫羊藿和当归的鉴定方法。

前所述芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法中，所述大枣的鉴别方法为：取低温干燥大枣果肉38-42 mg，照《中国药典中药材DNA条形码标准序列》中果实类药材DNA提取方法提取得到总DNA，照《中国药典中药材DNA条形码标准序列》中标准流程进行序列扩增，得扩增产物；扩增产物进行测序，根据测序结果统计其单倍型序列变异位点，共15条序列，比对后长度为221 bp，有2个变异位点，分别在88 位点T-C变异，94 位点A-G变异；主导单倍型序列特征如下：

CACAACGTTGCCCCCCATCCCAACCTCGACCTCGAGGCGAAGAGGGGGCGGATGCTGGCCTCCCGTGTGCCACGGTCCGCGGCTGGCCGAAATGCGGGTCCCCGGCGACGAGTGCCGCAGCAATCGGTGGTTGTCCAACCCTCGGCTCCCTGCTGCGTGCGCGGATCGCTGTCGCGGCCCTACAGAGACCCCAATGCGCTGCCAATGCGGCGTCTCCAACG，则为大枣，鉴定结束。

前述芪胶升白胶囊原料药材的DNA条形码鉴定方法中，所述淫羊藿的鉴别方法为：取药材及基原植物样本叶片18-22mg，照《中国药典中药材DNA条形码标准序列》中叶类药材提取方法提取得到总DNA；照《中国药典中药材DNA条形码标准序列》中标准流程进行序列扩增，得扩增产物；扩增产物进行测序，根据测序结果统计其单倍型序列变异位点：如果共10条序列，比对后长度为247 bp，有4个变异位点，分别为35位点的