[发明专利]一种运动障碍动物的建立方法及其用途

说明书

本发明涉及一种运动障碍动物的建立方法及其用途。本发明利用Prrt2基因降低表达或失活的动物，结合特定的实验操作工具以及操作方法，获得运动障碍动物模型。本发明的方法获得的动物模型是一种稳定的、呈现典型性状的运动障碍动物模型，可用于研究运动障碍疾病，并可以用于特定药物的筛选和测试试验。

技术领域

本发明涉及生物技术领域；更具体地，涉及一种运动障碍小鼠动物模型的建立方法及其用途。

背景技术

人富含脯氨酸的跨膜蛋白2(proline-rich transmembrane protein 2，PRRT2)(Entrez Gene:112476)基因位于人染色体16p11.2，包含四个外显子，其中第1个外显子不编码蛋白。PRRT2可能通过不同的mRNA剪接编码三种不同的蛋白异构体。其中主要的异构体1包含340个氨基酸残基，物种间相对保守(与哺乳动物相比约80％，与斑马鱼相比约30％)。异构体1主要包含富脯氨酸结构域和两个跨膜结构域。预测的包含394个氨基酸的异构体2有更长的羧基端，而包含299个氨基酸残基的异构体3是一种异构体1的截短型(Valtorta,F.,et al.,PRRT2:from Paroxysmal Disorders to Regulation of SynapticFunction.Trends in Neurosciences 2016Sep 10,39(10),668-679.)。

人类和啮齿类的证据都表明PRRT2是神经系统特异表达的蛋白，其分子功能可能涉及：PRRT2可定位于突触可能影响神经信号的传递；PRRT2可能影响神经元的迁移；PRRT2可能是神经递质释放相关蛋白复合体的重要成员。

PRRT2最初受到关注是因为其被指出可能是阵发性运动失调的致病基因，包括的临床症状有：(1)阵发性运动诱发性运动障碍(paroxysmal kinesigenic dyskinesia，PKD)；(2)阵发性运动诱发性舞蹈手足徐动症(paroxysmal kinesigenicchoreoathetosis，PKC)；(3)伴随婴儿惊厥的阵发性运动诱发性运动障碍(paroxysmalkinesigenic dyskinesia with infantileconvulsions，PKD/IC)。

更深入的研究发现PRRT2还可能与其他疾病症状有关系，包括但不限于如下症状：阵发性非运动诱发性运动障碍(paroxysmal nonkinesigenic dyskinesia，PNKD)；进行性共济失调(progressive ataxia)；良性家族性婴儿癫痫(benign familial infantileepilepsy，BFIE)；偏头痛(migraine)；偏瘫型偏头痛(hemiplegic migraine)；阵发性斜颈(paroxysmal torticollis)；睡眠期阵发性运动障碍(paroxysmal hypnogenic dystonia，PHD)；周期性共济失调(episodic ataxia，EA)；智力低下(mental retardation)。

人PRRT2的杂合突变不仅导致多样的临床症状，还表现为非完全显性，即有的杂合突变携带者不会发病。人PRRT2的纯合突变可能会导致严重的后果，同一个病人可能会有上述的几种症状，特别是智力低下。Prrt2基因的表达对基因的突变敏感，截短形式蛋白无法表达从而导致Prrt2缺乏，这可能是mRNA不稳定所致。