[发明专利]小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒

说明书

本发明公开一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括聚氧乙烯脂肪酸酯、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、十二烷基多肽和曲拉通X‑100；血清样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇在聚氧乙烯脂肪酸酯的作用下受到保护，其与胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶的反应在一定程度上被抑制，而其它脂蛋白胆固醇则在十二烷基多肽的作用下与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶反应而被消除；曲拉通X‑100与剩余的小而密低密度脂蛋白胆固醇反应检测出其含量。本发明能够用于快速方便地检测血清样本中的sdLDL‑C。本发明所述的试剂配方简单易制，成本低，能够大规模地产业化配制，同时本发明的试剂盒能够高效、准确、特异性地检测样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体是一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒。

背景技术

血液中的脂蛋白可以根据其密度大小分为高密度脂蛋白(HDL)，低密度脂蛋白(LDL)，极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(CM)四大类。不同种类的脂蛋白胆固醇对于引起动脉粥样硬化的能力不一样。通常临床上检测最多的组分是高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，就常规而言，高密度脂蛋白胆固醇对于动脉血管有一定的保护作用，其含量高发生心血管疾病的风险就低，低密度脂蛋白胆固醇则易引起动脉粥样硬化，增大发生心血管疾病的风险。然而，最近的研究表面，即使LDL-C的含量较低，有部分人群也容易发生心血管疾病，而部分LDL-C含量较高的人群却不一定会发生心血管疾病。这可能与LDL-C的不均一性有关，有研究显示，低密度脂蛋白的亚组分中颗粒较小密度较大的LDL称为小而密低密度脂蛋白(small dense Low-Density Lipoprotein，简称sdLDL)；而将颗粒较大、密度较低的LDL称为大而轻LDL。相比之下，sdLDL致动脉粥样硬化的能力更强，是目前公认的引发心血管疾病的重要危险因子之一。

目前的检测方法中，测定sdLDL的方法主要有电泳法、超速离心法、分级沉淀法等。但是电泳法测定的步骤繁琐，而且精密度和准确度都有待提高，临床应用性不强；超速离心法是测定脂蛋白类的标准方法，但是用该法检测sdLDL需要超速离心机，且检测通量不高，对操作人员的要求高，故该法在临床上也并未得到很好的推广；分级沉淀法虽然使得操作上相对简单，但仍然需要沉淀步骤，该法的精密度和准确度都相对较差，不适合临床应用。因而急需一种简单快速的方法能够检测sdLDL或者sdLDL-C。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，能够用于快速方便地检测血清样本中的sdLDL。本发明所述的试剂配方简单易制，成本低，能够大规模地产业化配制，同时本发明的试剂盒能够高效、准确、特异性地检测样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)。

本发明人通过长期地研究发现，聚氧乙烯脂肪酸酯对于sdLDL-C的反应有一定的抑制保护作用，而十二烷基多肽则对除sdLDL-C以外的脂蛋白的反应性更强，因此通过聚氧乙烯脂肪酸酯和十二烷基多肽的组合，实现对sdLDL-C特异性地检测。

为了实现上述技术方案，本发明的小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括聚氧乙烯脂肪酸酯、胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、十二烷基多肽和曲拉通X-100；血清样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇在聚氧乙烯脂肪酸酯的作用下受到保护，其与胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶的反应在一定程度上被抑制，而其它脂蛋白胆固醇则在十二烷基多肽的作用下与胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶反应而被消除；曲拉通X-100与剩余的小而密低密度脂蛋白胆固醇反应检测出其含量

具体地，本发明提供一种小而密低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括试剂R1和R2，其中：

试剂R1含MOPS缓冲液(pH7.0)，胆固醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化物酶，聚氧乙烯脂肪酸酯，十二烷基多肽，TOOS，叠氮钠；

试剂R2含MOPS缓冲液(pH7.0)，曲拉通X-100，4-AAP(4-氨基安替比林)，叠氮钠。