[发明专利]一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法

说明书

本发明公开了一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法。(1)将烟草废料烘干，粉碎，过筛；(2)将粉碎后的烟草废料置于溶剂中，静置，微波处理，然后高压脉冲电场处理，然后用盐酸溶液调节PH，超声波提取，抽滤，收集滤液，滤渣再重复上述步骤提取一次，抽滤，合并两次滤液，弃去滤渣，向滤液加入保护剂，冰箱中冷藏，除去底层沉淀，旋转蒸发回收丙酮并浓缩，离心分离取上清液；(3)将大孔吸附树脂湿法装柱后加入上清液进行吸附，吸附完毕后用乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；(4)将上述制得的洗脱液旋转蒸发回收乙醇并浓缩，然后放入冰箱中冷冻，再放入冷冻干燥机中干燥，即得绿原酸粗品。本发明方法绿原酸提取率高。

技术领域

本发明涉及一种绿原酸的提取方法，具体涉及一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法。

背景技术

绿原酸(Chlorogenis Acid)又称咖啡单宁，是植物在有氧呼吸过程中合成的一种苯丙素类化合物。现代药理研究表明，绿原酸是一种重要的生理活性物质，有“植物黄金”之美誉。它不仅具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、降血压、降血脂、清除自由基及兴奋中枢神经系统等多种功能，而且对大肠癌、肝癌和喉癌有显著的抑制作用，被认为是癌症的有效防护剂。研究认为，绿原酸将有希望成为抗艾滋病毒(HIV)的先导药物。现代科学对绿原酸生物活性的研究已深到食品、医药、保健和日用化工等领域。

我国是烟草大国,种植面积和产量均居世界首位，每年烟叶产量450-550万吨。烟草种植与产品加工在国民经济中发挥着重要的作用。目前国内外种植的烟草主要用作卷烟。由于地理环境、种植技术等原因，每年都有一定数量的低等级的烟叶不能用于卷烟生产，同时卷烟生产过程中也不可避免产生一些下脚料，烟草工业每年都有大量的烟末、霉变烟草、低次烟草等作为废弃物被扔掉，既浪费资源又污染环境。烟草废料的有效成分提取是其综合利用途径之一，烟草废料中含有大量的多酚类物质，其中含量最高的为绿原酸，因此有必要将其浸提出来。

绿原酸等多酚类物质在植物中普遍存在，传统工艺大多是从金银花、杜仲叶中提取，从烟草废料中提取还很少报道，利用高压脉冲电场结合微波、超声波从烟草废料中提取绿原酸更是未见报道。因此，本发明公开了一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法，为烟草废料的综合利用开辟了一条新的途径。

发明内容

本发明的目的在于一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法，本发明方法操作简单，提取率高，提取时间短，且被提取活性物质不被破坏。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

一种高压脉冲电场结合微波、超声波提取烟草废料中绿原酸的方法，包括如下步骤：

(1)将烟草废料在50-60℃下烘干，粉碎，过20-40目筛；

(2)将粉碎后的烟草废料置于相当于烟草废料重量10-15倍的溶剂中，静置1-2h，微波处理2-3次，每次20-30s，然后高压脉冲电场处理1-3ms，然后用摩尔浓度为0.1mol/L的盐酸溶液调节PH为5-6，超声波提取20-30min，抽滤，收集滤液，滤渣再重复上述步骤提取一次，抽滤，合并两次滤液，弃去滤渣，向滤液加入相当于烟草废料质量0.2-0.3％的保护剂，置于2-5℃冰箱中冷藏24-48h，除去底层沉淀，旋转蒸发回收丙酮并浓缩至原来体积的1/3-1/2，离心分离取上清液；

(3)将大孔吸附树脂湿法装柱后加入上清液进行吸附，柱径与树脂高之比为1∶6-8，吸附完毕后用体积分数为40-60％的乙醇水溶液进行洗脱，调节流速为3-6BV/h，收集洗脱液；

(4)将上述制得的洗脱液旋转蒸发回收乙醇并浓缩至原来体积的3/5-4/5，然后放入-50～-65℃冰箱中冷冻30-50min，再放入冷冻干燥机中干燥24-48h，即得绿原酸粗品。

进一步地，所述溶剂为丙酮和水组成的溶液，其中丙酮与水的体积比为1:1-2。