[发明专利]检测大豆脲酶活性的方法及检测管有效
申请号: | 201710478271.1 | 申请日: | 2017-06-22 |
公开(公告)号: | CN107177664B | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 王金荣;苏兰利;李硕;赵银丽;安娜 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
代理公司: | 郑州德勤知识产权代理有限公司 41128 | 代理人: | 宋建勋 |
地址: | 450001 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 大豆 脲酶 活性 方法 | ||
本发明提供了一种大豆脲酶活性检测管,包括依次连接的尿素甲酚红钠盐提取液管、样品定量管和瓶盖,该检测管结构简单、取样质量稳定不会产生较大波动。本发明还提供一种检测大豆脲酶活性的方法,其步骤包括在所述样品定量管中加入大豆粉样品,并将所述样品定量管连接所述尿素甲酚红钠盐提取液管顶部,震荡并记录颜色变化时间,根据相对应的拟合方程计算大豆粉样品的大豆脲酶活性值。该检测方法步骤简单、检测过程耗时短,对操作人员娴熟度和设备要求不高,且检测结果与国标法检测结果一致。
技术领域
本发明属于酶活性检测的方法,尤其是涉及一种检测大豆脲酶活性的方法及检测管。
背景技术
大豆中含有胰蛋白酶抑制因子使得大豆制品的应用受到限制,动物食用后,易引起拉稀或软便等症状,尤其对于仔猪更容易引起仔猪腹泻。由于胰蛋白酶抑制因子难以检测,而大豆中的脲酶与胰蛋白酶抑制剂的性质相近,通常采用测定脲酶活性的方法来判定大豆的生熟程度。实验室定量测定脲酶活性的方法比较复杂,有滴定法和pH增值法。这两种方法测定的结果十分准确,但要求有一定的设备条件及娴熟的操作技术,并且检测时间长,因此很难用于现场检测,因此对于饲料厂、港口等豆粕及大豆制品原料接收的检验十分不便,不能满足现场的简便、快速检测大豆脲酶活性的需要。
为了解决以上存在的问题,人们一直在寻求一种理想的技术解决方案。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种检测大豆脲酶活性的方法及检测管,以解决上述问题。
为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案是:一种大豆脲酶活性检测管,包括尿素甲酚红钠盐提取液管、样品定量管和瓶盖,所述样品定量管螺纹连接在所述尿素甲酚红钠盐提取液管和所述瓶盖之间;
所述尿素甲酚红钠盐提取液管内盛装有尿素甲酚红钠盐提取液;所述尿素甲酚红钠盐提取液是由浓度为0.01%~0.1%的甲酚红钠盐乙醇溶液与浓度为1.3%~10.5%的尿素水溶液按照体积比为(1~5):2混合制取的。
基于上述,所述样品定量管的容量为0.01g、0.02g、0.03g或0.05g。
基于上述,所述瓶盖的一端和所述尿素甲酚红钠盐提取液管的顶部分别设置有外螺纹,所述样品定量管的开口两端上分别活动设置有密封圈。
本发明还提供一种利用上述大豆脲酶活性检测管检测大豆脲酶活性的方法,具体包括以下步骤:
提供待测样品:对大豆粉分别进行烘焙处理不同时间,得到N份不同脲酶活性大豆粉;
检测待测样品:利用上述大豆脲酶活性检测管分别对所述N份不同脲酶活性大豆粉进行检测,得到N份尿素甲酚红钠盐提取液变色耗时数值;
建立拟合方程:首先采用GB/T8622-2006国标法依次对N份所述不同脲酶活性大豆粉进行大豆脲酶活性测定,得到N份大豆脲酶活性标准值,然后根据N份所述大豆脲酶活性标准值和N份所述尿素甲酚红钠盐提取液变色耗时数值,建立尿素甲酚红钠盐提取液变色耗时数值与待测样品中大豆脲酶活性标准值之间的拟合方程。
基于上述,所述检测待测样品步骤包括:首先采用相同容量的所述样品定量管将N份所述不同脲酶活性大豆粉置于N份同等体积的所述尿素甲酚红钠盐提取液管中混合、静置,计算所述尿素甲酚红钠盐提取液开始变色至颜色稳定时所需时间,得到N份所述尿素甲酚红钠盐提取液变色耗时数值,其中N为大于等于2的自然数。
基于上述,所述检测待测样品步骤中,每10mL所述尿素甲酚红钠盐提取液中加入所述不同脲酶活性大豆粉的质量为0.02g。
基于上述,当每10mL所述尿素甲酚红钠盐提取液中加入0.02g所述不同脲酶活性大豆粉时,建立的尿素甲酚红钠盐提取液变色耗时数值与大豆脲酶活性标准值之间的拟合方程为:
Y=1.583ln(t)+7.4486,
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