[发明专利]检测人体CYP3A4代谢酶表达用的LncRNAs生物标志物及其检测引物和检测方法

权利要求书

1.检测人体CYP3A4代谢酶表达用的LncRNAs生物标志物，其特征在于，所述LncRNAs生物标志物包括：HNF1A-AS1和NONHSAT031260，其中，

所述HNF1A-AS1的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.4所示；

NONHSAT031260的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.5所示。

2.检测权利要求1所述的LncRNAs生物标志物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

Step1：抽提肝脏组织总RNA；

Step2：将mRNA反转录成cDNA；

Step3：以GAPDH为内参基因，进行QPCR反应，具体如下

(1)引物设计如下：

(2)反应体系如下：

反应程序设置为：50℃2min，95℃2min；95℃15s，60℃1min，循环数为40；

溶解曲线反应为：95℃15s，60℃ 1min，95℃15s，60℃ 15s；

在每个循环退火与延伸时读取荧光强度；

Step4：对Real-time PCR数据进行分析，Real-time PCR数据以荧光强度ΔRn与循环数表示，logΔRn对循环数函数的中间值设为阈值，当某个样品的ΔRn值与该阈值有交点时，交点处的循环数记为Ct，采用相对定量的方法检测成人肝脏组织中HNF1A-AS1和NONHSAT031260的表达水平，目的基因cDNA相对于内参GAPDH增加的倍数用下面的公式表示：

变化倍数＝2^-ΔΔCt，

ΔΔCt＝(Ct_目的-Ct_GAPDH)T_x-(Ct_目的-Ct_GAPDH)T₀

其中，T_x表示任意时间点，T₀表示起始时间点；

Step5：用标准曲线来检测用2^-ΔΔCt方法表示的相对定量和基因绝对量的平行关系；

以上步骤为非诊断目的的方法。

3.检测权利要求1所述的LncRNAs生物标志物的引物，其特征在于，序列如下：