[发明专利]一种化学发光技术检测DNA的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种化学发光技术检测DNA的方法，其原理是以鲁米诺还原氯金酸，得到鲁米诺胶体金纳米粒子LumAuNPs，以探针DNA修饰LumAuNPs，得化学发光探针；然后以磁珠为载体固定发卡结构的捕获DNA，在目标物DNA存在时，捕获DNA的发卡结构被打开，并在化学发光探针上的探针DNA的杂交作用下，通过催化发卡自组装技术将化学发光探针连接在磁珠表面；经过磁分离后，再加入羟胺‑O‑磺酸，以LumAuNPs—羟胺‑O‑磺酸为化学发光体系，进行化学发光测定，根据产生的化学发光实现目标DNA的测定。方法具有简单、灵敏度高的优势。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种化学发光技术检测DNA的方法。

背景技术

鲁米诺是常用的化学发光试剂，广泛应用于各种化学发光分析检测中。然而，鲁米诺化学发光产生较高的背景信号，故其应用受到一定的限制。近年来，功能化的胶体金受到了研究者的青睐，可以使用钌配合物、鲁米诺及其衍生物还原氯金酸的方法合成胶体金(Cui H,Wang W,Duan C F,et al.Synthesis,characterization,andelectrochemiluminescence of luminol-reduced gold nanoparticles and theirapplication in a hydrogen peroxide sensor[J].Chemistry,2007,13(24):6975-6984；Gao W,Qi W,Lai J,et al.Thiourea dioxide as a unique eco-friendly coreactantfor luminol chemiluminescence in the sensitive detection of luminol,thioureadioxide and cobalt ions[J].Chemical Communications,2014,51(9):1620-1623.)，其中，采用鲁米诺还原氯金酸得到的胶体金称为LumAuNPs，在双氧水存在时得到较强的化学发光信号。由于双氧水不稳定而且可与很多金属离子反应，所以它的选择性不好。鉴于现有技术的不足，本发明利用LumAuNPs—羟胺-O-磺酸化学发光检测体系实现了DNA的测定，具有灵敏度高、方法简单等特点。

发明内容

本发明旨在发明一种方法简单、灵敏度高的测定DNA的方法。

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种化学发光技术检测DNA的方法。

实现本发明目的技术方案是：

一种化学发光技术检测DNA的方法，其原理是以鲁米诺还原氯金酸，得到鲁米诺胶体金纳米粒子LumAuNPs，以探针DNA修饰LumAuNPs，得化学发光探针；然后以磁珠为载体固定发卡结构的捕获DNA，在目标物DNA存在时，捕获DNA的发卡结构被打开，并在化学发光探针上的探针DNA的杂交作用下，通过催化发卡自组装技术将化学发光探针连接在磁珠表面；经过磁分离后，再加入羟胺-O-磺酸，以LumAuNPs—羟胺-O-磺酸为化学发光体系，进行化学发光测定，根据产生的化学发光实现目标DNA的测定。

本发明是通过以下措施来实现的：一种化学发光技术检测DNA的方法，其特征是包括以下步骤：

(1)鲁米诺胶体金纳米粒子的制备；

(2)捕获DNA修饰磁珠的制备；

(3)探针DNA修饰LumAuNPs的制备；

(4)目标DNA的检测。

优选的，所述的鲁米诺胶体金纳米粒子的制备包括以下步骤：